环氧合酶-2在实验性肝硬化门静脉高压形成中的作用-内科学专业论文.docx

复旦大学博士学位论文 复旦大学博士学位论文 中文摘要 摘要 环氧合酶一2在实验性肝硬化门静脉高压形成中的作用 第一部分 选择性COX一2抑制剂对CCI。诱导肝硬化大鼠门静脉压力的影响 韭基皇旦丝：环氧合酶(cyclooxygenase，COX)是前列腺素类物质合成的关 键酶，COX有两种异构酶：即COX—l和COX一2。近来发现在肝硬化实验性动物模 型及肝硬化患者的肝组织中COX一2表达是明显升高的，提示COX一2可能在肝硬化 门静脉高压形成过程中发挥重要作用。本实验的目的在于探索COX一2在肝硬化门 静脉高压形成过程中的作用，探索选择性COX一2抑制剂罗非昔布能否降低CCI。 诱导肝硬化大鼠门静脉压力及其可能机制。 方法：用CCI。(CCI；／olive oil：v／v=l／1)经腹腔注射，每周2次共8周 诱导雄性S—D大鼠肝硬化模型。将s—D大鼠随机分4组：正常对照组(n=lO)给橄 榄油腹腔注射；模型对照组(n=14)，在CCI。诱导肝硬化模型的同时给予同等体 积的生理盐水灌胃；罗非昔布组(n=14)，在CCI。诱导肝硬化模型的同时给予罗 非昔布(按每日每kg体重lOmg溶于lOml生理盐水中灌胃)：米索前列醇组(以 PGE．表示，下同)(n=14)：在CCI。诱导肝硬化模型的同时给予PGE，(按每只大鼠 每日10u g溶入2ml生理盐水中灌胃)。第8周末测定门静脉压力(PP)，并检测 肝组织PGEz、TXBt浓度。最后用Western blot检测肝组织COX一2表达和病理组 织HE染色。 璧墨：经CClt处理的各组的压力较正常对照组大鼠明显升高(pO．01)， COX一2抑制剂罗非昔布干预组与肝硬化模型组相比，门静脉压力显著降低(分别 为11．95±1．05mmHg VS．13．45±1．15 mmHg，尺O．05)，每日给予10¨g PGE， 干预组与肝硬化模型相比无统计学意义。随着肝硬化的形成，肝组织TXB。和PGE： 是明显升高的。选择性COX一2抑制剂能通过对COX一2的抑制，从而使其产物减少 (TXB：在肝硬化模型组和罗非昔布组分别为：352．84-72．1 VS．262．2±77．7， PO．05：PGE：在肝硬化模型组和罗非昔布组分别为：870．3±230．1 VS．653．3± 198．7，尺O．05)，两者在PGE．组与肝硬化模型组无显著差别(TXB。在肝硬化模型 组和PGE．组分别为：352．8±72．1 VS．354．6±68．5，P20．05：PGE：在肝硬化模型 组和PGE。组分别为：870．3±230．1 VS．855．34-_293．9，乃0．05)。正常肝组织有 少量的COX-2表达，随着肝硬化的形成，COX一2表达显著增加，与正常对照相比 pO．01；与肝硬化模型组相比，罗非昔布组和PGE，组均无差异。 箜迨：COX一2／PGs在肝硬化门静脉高压形成过程中发挥重要作用，尤其是 复旦大学博士学位论文 复旦大学博士学位论文 中文摘要一 COX一2来源TXA：与门静脉高压密切相关。长期使用选择性的COX一2抑制剂能有效 的改善实验性肝硬化大鼠门静脉压力。其降低门静脉压力的机制至少与COX一2 抑制剂降低肝组织TXA。的浓度有关。 苤笪丑：环氧合酶一2；肝硬化；肝纤维化：门静脉压力：门静脉高压；环氧 合酶2抑制剂 第二部分 COX-2对CCl。诱导大鼠肝纤维生成及肝窦毛细血管化形成的影响 萱量生目的：肝内血管阻力的升高是门静脉高压的启动因素，对肝硬化门静 脉高压的形成至关重要。结构性紊乱是肝硬化门静脉高压形成的基础：即在肝纤 维生成过程中，正常肝小叶结构的改建、纤维疤痕组织在肝脏沉积和再生结节形 成对门静脉和中央静脉血管的机械挤压，肝窦毛细血管化的改变直接影响门静脉 血管阻力等肝内血管阻力增加。肝纤维生成和肝窦毛细血管化形成过程是一种损 伤一愈合反应过程，必然伴有血管生成，由于COX一2的PGs产物PGE：、TXA。、PGI： 等具有促血管生成作用，推测其对肝纤维生成和肝窦毛细血管化形成可能存在广 泛的影响。本实验目的在于：观察选择性COX一2抑制剂及PGE．对实验性大鼠肝 纤维生成及肝窦毛细血管化形成的影响。 方法：肝硬化模型诱导及给药措施同前，病理组织学观察肝纤维化严重程度 并评分，为了半定量分析肝纤维化严熏程度，通过Magson三色染色法将胶原染 成篮色，用图像分析仪自动分析胶原面积。电镜观察肝蜜超微结构改变。计数肝 窦内C【SMA阳性的细胞数来观察肝星状细胞的活化。用Western b1 ot和免疫组 织化学检测基底膜蛋白主要成分层粘连蛋白(1aminin，LN)和lV型胶原。以VII T 因子相关抗体vWF标记的血管部分表示肝组织微血管密度。 结果：(1)在CCl