组织学与胚胎学histologyandembryology-山东大学.PPTVIP

组织学与胚胎学;绪 论; 组织学的定义和研究内容;Cell tissue organ system;细胞(Cell) ：人体和其他生物体结构和功能的基本单位(the smallest structural functional unit) ;细胞膜;组织tissue ：一种或几种细胞聚集形成的细胞群体称为组织。 细胞 细胞外基质 是细胞产生的、存 在于细胞间的物质， 包括纤维和基质，是细胞生存的微环境。 构成人体的基本组织有4种， 上皮组织、结缔组织、肌肉组织和神经组织;器官（ Organ ）:; 微细结构 1. 光镜结构：光学显微镜(Light microscope，LM) 计量单位是微米(μ m ) (1 μ m =0.001 mm) 2. 电镜结构：电子显微镜(Electron microscope，EM): 计量单位是纳米(nm ) (1 nm =0.001 μ m) ;光学显微镜基本结构： 1. 照明灯(Lamp) 2. 聚光器(Condenser) 3. 载物台和切片夹(Mechanical stage and specimen retainer) 4. 推进器(Mechanical stage adjustment knob) 5. 物镜(Objectives) 6. 粗细螺旋(Course and fine focus knob) 7. 目镜(Oculars) 8. 照相机等接口(Connection to camera, etc.);组织学的研究方法和技术 ;LM技术: 分辨率(Resolution)是指能够分辨相邻两点之间的最小距离。LM的分辨率约为200μm 切片(Section): 将组织切薄使光线可以透过 1. 取材、固定(Fixation):取材一般在动物死后2小时以内取。为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛，苦味酸等固定剂中，其目的在于使组织中的蛋白质迅速凝固，从而保持标本的结构接近于其生前的正常状态;2. 石蜡包埋(Paraffin embedding) * 脱水(Dehydration): 用浓度逐渐升高的酒精 (70~100%)将组织中的水完全置换出来 * 透明(Clearing): 用二甲苯完全置换出酒精 浸蜡(Infiltration): 在60~62?C时，用液态石蜡完全置换出二甲苯 包埋(Paraffin embedding):浸蜡后，把组织块放入装有溶化的固体石蜡的包埋器中，待石蜡凝固后，组织块便被包埋在里面，成为蜡块;3. 切片: 用切片机将组织切成1~20μm厚的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，裱到有粘附剂的载玻片上;除切片外，还有其他处理组织的方法： * 铺片(Whole mount): 用于很薄的组织，如肠系膜 * 磨片(Ground section): 用于很坚硬的组织，如骨和牙 * 涂片(Smear): 用于液态组织，如血液，精液和体液;2. 染色(Staining): 染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前，需要脱蜡，因为染料是水溶性的。常用的染色方法是苏木素伊红染色，简称ＨＥ染色;染色;常用的染色方法是苏木素(Hematoxylin, H)和伊红(Eosin, E)染色，简称ＨＥ染色。 苏木素是一种碱性染料，可使组织细胞中的酸性物质（又称嗜碱性物质）染成紫蓝色，如细胞核中的染色质等； 伊红是一种酸性染料，可使组织细胞中的碱性物质（又称嗜酸性物质）染成红色，如多数细胞的细胞质、核仁等在HE染色的切片中均呈红色，很易跟细胞核区别; 如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结构具有异染性(Metachromasia)。如肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色 ; 如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子而使自身显示棕黑色，该结构具有嗜银性(Argyrophilic) 网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示;其他染色方法，如瑞士染色、PT染色等;在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶封片，以便长期保存 * 切片: 固定 → 梯度酒精 →二甲苯 → 石蜡。 * 染色: 石蜡 →二甲苯→梯度酒精 → 水。 * 保存: 水 →梯度酒精 →二甲苯→中性树胶;电镜技术: EM可分为透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)2类 2. EM的原理和LM相似，但用电子束代替光线，磁场代替玻璃透镜。分辨率约为0.2 nm ;EM的组织的制备与LM的相似，但有以下不同: a. 通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定 b. 切片超薄 (厚度小于90nm)，塑胶包埋 c. 用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此，所有