乳腺癌中ABCG2、Pgp及血标本淋巴细胞亚群研究.docVIP

乳腺癌中ABCG2、P-gp及血标本淋巴细胞亚群研宄 郭建美1郑淑君1通讯 魏娜1黄韬2 保定市第一中心医院河北保定071000; 保定市儿童医院河北保定071000 【 】目的：通过检测乳腺癌组织中ABCG2、P-gp蛋白的表达和外周血 标木T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群及NK细胞比值，探讨其相关性和临床意 义。方法：1免疫组织化学方法检测20例乳腺癌组织中ABCG2、P-gp蛋白表达 情况；2四色荧光标记流式细胞术检测相同患者术前外周血T淋巴细胞亚群、B 淋巴细胞亚群及NK细胞比值。结果：ABCG2蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚 群中CD4+淋巴细胞、CD8+淋巴细胞、CD4+/CD84■比值和NK细胞比值无关（P〉 0.05），与CD3+淋巴细胞（「=-0.600）和B淋巴细胞计数（r=-0.503）有关（P0.05）。 P-gp蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚群中CD3+淋巴细胞、CD4+淋巴细胞、CD8+ 淋巴细胞、CD4+/CD8+比值和B淋巴细胞计数无关（P〉0.05）,与NK细胞比值 有关（r=0.471,P0.05）。结论：ABCG2蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚群中 CD3+淋巴细胞和B淋巴细胞计数具有相关性,提示乳腺癌患者乳腺癌耐药蛋白表 达可能与机体免疫功能相关。P-gp蛋白表达与乳腺癌患者淋巴细胞亚群中NK细 胞比值只有相关性，但是对乳腺癌患者T淋巴细胞和B淋巴细胞无相关性,提示乳 腺癌患者P-糖蛋白表达可能与机体NK细胞杀伤功能相关。 【关键词】乳腺癌；淋巴细胞亚群；免疫组织化学；流式细胞术 【 】R737 【 】A 【 】1674-8999 （ 2015） 9-0604-02 近年来，乳腺癌的发病率呈逐年上升趋势，研究发现肿瘤的多药耐药直接影 响到乳腺癌患者化疗疗效，成为化疗失败的重要难题。并且肿瘤的发生和发展是 一个非常复杂的过程，与机体免疫功能具有密切的关系。Ahmed等对早期造血细 胞的研宄表明，在体外ABCG2可使原祖细胞增加，CD19 +淋巴细胞的发育受损， 降低移植小鼠B淋巴细胞数量；在体内ABCG2增加部分祖细胞的比例和原始祖 细胞群的数量，在早期造血过程中作为调节蛋白起到重要的作用。所以探讨 ABCG2、P-gp在乳腺癌中的表达及与淋巴细胞亚群的关系不仅可以了解乳腺癌患 者自身耐药情况，对术后应用化疗药物具有重要的指导作用，并且在理论的指导 下进行实践具有一定的创新意义。 1 一般资料 1.1标本来源 免疫组织化学方法标本取自保定市第一中心医院2008年9月?2010年12 月手术治疗的乳腺肿瘤患者的存档蜡块。标本均常规取材，中性甲醛固定，常规 石蜡包埋，5mu;m厚连续切片。其中乳腺癌85例，包括浸润性导管癌（非特 殊型）66例，浸润性小叶癌15例，髓样癌2例，导管内癌2例，病理分期（按 2010AKC乳腺癌分期标准）为I?III期，年龄34?62岁，平均年龄47.4岁；同 时取乳腺纤维腺瘤组织40例为对照组，年龄23?42岁，平均年龄31.2岁。 全部标本均经病理证实，所有病例术前均未进行放疗、化疗及内分泌治疗。 1.2研究方法 采用免疫组织化学SP两步法进行ABCG2、P-gp检测。小鼠抗人BCRP/ABCG2 单克隆抗体BXP-21（ab3380）购自英国Abeam公司，稀释浓度为1:20, P-gp抗体 及相关试剂盒均购自迈新生物技术开发有限公司，步骤严格按照试剂盒说明操作。 流式细胞术采用美国Beckman Coulter公司四色数字化流式细胞仪及其相应配套 试剂。采集肿瘤病人及健康体检者血标本，取标记抗体各10mu;l分别加入 TruCOUNT试管管底，然后加入EDTA抗凝血100mu;l，充分混匀,室温避光染色 20min、再加入溶血素500mu;l,充分混匀，室温避光15min，再加500mu;l的PBS, 室温避光lOmin，后进行流式细胞术分析。 2统汁学分析 数据结果采用统计软件SPSS11.5进行统计分析，ABCG2和P-gp蛋白表达与 乳腺癌患者淋巴细胞亚群各指标相关性分析，采用Spearman等级相关分析，均 以alpha;=0.05作为检验标准。 3结果 3.1乳腺癌患者组织中ABCG2蛋白表达与相同患者术前外周血淋巴细胞亚 群中CD4+淋巴细胞、CD8+淋巴细胞、CD4+/CD8+比值和NK细胞比值无关 (Pgt；0.05),与CD3+淋巴细胞和B淋巴细胞计数奋关。CD3+淋巴细胞比值正 常者ABCG2蛋白表达率(10.0%)低于不正常吋(40.0%),差异有统计学意义 (Plt;0.05)； B淋巴细胞比值正常者ABCG2蛋白表达率(10.0%)低于不正常吋 (40.0%),差异有统计学意义(Plt;0.05)(见表)。 3.2乳腺癌患者组织中P-