P504S、P63、K34βE12、PSA联合检测在前列腺良恶性病变中的表达及应用价值.docVIP

P504S、P63、CK34 3 E12 PSA联合检测在前列腺良恶性病变 中的表达及应用价值 黄洪欣1辛志峰2姜长青3* (1山东青岛公安消防医院山东青岛266016) (2山东青岛崂山区妇幼保健院山东青岛266067; 3山东青岛市立医院山东青 岛 266011) 屮图分类号】R697+.3 】A 】1672-5085(2013)02-0045-03 】 目的探讨P504S、P63、CK34beta;E12、PSA在前列腺良恶性病变 屮的表达及联合检测的应用价值。方法应用免疫组化(增强型PV6000)对前 列腺癌(PC) 108例、高级别前列腺上皮内瘤变(HGPIN) 10例、低级别前列腺 上皮内瘤变(LGPIN) 53例、良性前列腺增生(BPH) 90例进行P504S、 CK34beta;E/12、P63、PSA联合检测。结果P504s在PC组阳性表达率93.52%, 明显高于 HGPIN、LGPIN、BPH 组(Plt;0.01)； CK34beta;E12 和 P63 在 PC 组阳 性表达率均为 2.78%,明显低于 HGPIN、LGPIN、BPH 组(Plt;0.01)； PSA 在 4 组前列腺病变屮均为阳性表达。结论联合检测P504S、CK34beta;E12、P63、 pSA等4种标记物可提高前列腺良恶性疾病诊断和鉴别诊断的准确率。 关键词】前列腺癌 BPH PIN P504S 34beta;E12 P63 PSA 近年来在屮国前列腺癌的发病率呈现上升趋势，其诊断虽然主要依赖于 标准的HE染色，但实际工作屮鉴别前列腺良、恶性病变还是较为困难。前列腺特 异抗原(PSA)是目前最常用的前列腺病变标记物，但缺乏特异性。高分子量角蛋 白CK34beta;E12和P63作为基底细胞特异性标记物，是鉴别诊断前列腺良、恶 性病变的重要指标。国外研宄报道，P504S(alpha;-甲酰基辅酶A-消旋酶)则是新 近发现的前列腺癌细胞的阳性标记物［1,2］。本研究选取261例前列腺手术切除及 穿刺活检标本进行P504S、PSA与CK34beta;E12和P63免疫组化联合检测，旨 在探讨4种标记物检测在前列腺良、恶性病变诊断与鉴别诊断的应用价值。 材料与方法 1.1材料 选取青岛市立医院病理科2007?2011年前列腺手术切除及穿刺活检标 本261例，按病变性质分4组：前列腺癌(PC) 108例，高级别前列腺上皮内瘤 变(HGPIN)IO例，低级别前列腺上皮内瘤变(LGPIN)53例，良性前列腺增生(BPH)90 例。前列腺癌患者年龄53?91岁，平均72岁。 1.2试剂 即用型兔抗人P504S单克隆抗体工作液、即用型鼠抗人P63、 CK34beta;E12、PSA单克隆抗体工作液、增强型PV6000超敏免疫组化试剂盒均 购自北京中衫金桥生物技术有限公司。 1.3方法 所有标本均采用4%的中性福尔马林固定。组织经常规处理，石蜡包埋， 4mu;m连续切片，HE染色，显微镜观察。将石蜡切片常规脱蜡至水后置修复 液中高温高压抗原修复，0.3%的H2O2-甲醇液封闭内源性过氧化物酶，一抗4°C 过夜，相关二抗，DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片。以PBS代替一抗作为 阴性对照，P504S、P63、CK34beta;E12和PSA已知阳性切片作为阳性对照。 1.4Gleason评分方法 PC的HE染色切片在光镜下按Gleason分级标准进行评分，具有2种结 构类型的Pea, Gleason评分=主要结构类型(级别)+次要结构类型(级别)，只冇1 种结构类型的Pea,视为主要结构类型和次要结构类型相同。按Gleason分级评 分结果分成两组，2?6分26例，7?10分82例。 1.5结果判断 P504S和PSA阳性表达定位于癌细胞或腺上皮细胞的细胞浆， CK34beta;E12阳性染色定位于基底细胞的细胞浆，P63阳性染色定位于基底细 胞的细胞核。P504S以低倍镜(times;100)下能看到胞质出现棕黄色着色为阳性， 按染色强度计分：阴性(-＞，细胞不着色或背景同阴性对照；弱阳性(+)，低倍镜下 能看到浅的棕黄色着色，高于背景颜色，高倍镜下能看到胞质内较少的棕黄色颗 粒；阳性(++)，低倍镜下看到胞质内明显的棕黄色颗粒；强阳性(+++)，棕黄色着 色颜色深，密度大，非常明显。 1.6统计学分析 采用SPSS17.0版统计软件包进行统计学分析，数据采用chi;2检验或 Fisher确切概率法，Plt;0.05为差异有显著性。 结果 2.1Gleaso n评分分值不同的前列腺腺癌及其P504S免疫表达结果 前列腺癌组中按照Gleason分级分为两组，应用卡方检验比较两组的构 成比，P=0.353,两组比较无显著性差异(Pgt