生物化学-核苷酸与核酸课程PPT.pptVIP

* The process of denaturation * Hyper- and hypo-chromic effects 单核苷酸单链DNA双链DNA DNA变性，使溶液A260增高，称为增色效应。 在解链曲线中的中点称为中点解链温度，或解链温度(Tm)。 变性和复性是可逆的。 * melting temperature, Tm Tm：变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(影响因素： 1．DNA均一性决定熔解温度范围大小； 2．G-C碱基对含量决定熔解温度高低； 3．介质中的离子强度影响变性。 * * DNA renaturation DNA Recovery of the double helix structure.复性。 The process of DNA renaturation after heated denaturation. 退火(annealing) 。 减色效应 Hypochromic affect DNA复性时，其溶液A260降低。 * hybridization 杂交：不同的DNA链放在同一溶液中作变性处理，或把单链DNA和RNA放在一起，局部的碱基配对，就可以形成局部双链，在不同的分子间形成杂化双链（heteroduplex）。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子之间或者RNA和RNA分子之间形成。这一过程称为核酸分子杂交。 * Probe 探针：a kind of technology used for detection and probing certain nucleotide sequence. Labeled single oligonucleotide chain * Nuclease digests nucleic acids. DNA酶(deoxyribonuclease, DNase)： 专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase)： 专一降解RNA。 *  Nuclease 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：5?→3?或3?→5?核酸外切酶。 * * 三、 DNA functions Gene：A unit or a fragment in DNA molecules, which is able to be replicated and transcripted. Gene acts as a genetic basic unit.是生物遗传繁殖的物质基础。 * DNA functions DNA and gene carry genetic information as its basic function. The sequence in its molecule can be used as template for replication and transcription. DNA is genetic material and therefore varies individually. * RNA * General features in structure 组成RNA分子的4种核苷酸A、G、C、U; 核糖2’位都有羟基; 一般分子较小，核苷酸数目变异多，70-几千个，人的DNA 280万kb; 大多数RNA分子都成线状单链，局部单链折叠形成双螺旋，类似于A-DNA双螺旋，形成发夹结构，三叶草结构； 总量多于DNA，哺乳细胞RNA10pg,而DNA至多6.38pg。 * General features 相同点 4种核苷酸也通过3’，5’-磷酸二酯键相连接 * General features in function 遗传信息的传递体 也是遗传信息的储存体 远古时生命可能起源于RNA,因为RNA可以自身复制； RNA还具有某些蛋白质的功能 参与基因的调控。 * Capping Type 0：m7G5’ppp5’Np Type 1：m7G5’ppp5’NmpNp Type 2：m7G5’ppp5’NmpNmpNp * 帽子结构功能 保护mRNA不被核酸外切酶水解 与核糖体识别结合，与翻译起始相关 * 帽子结构功能 mRNA的帽结构可以与一类称为帽结合蛋白（cap binding proteins, CBPs）的分子结合。 这种mRNA和CBPs复合物对于mRNA从细胞核向细胞质的转运、与核蛋白体的结合、与翻译起始因子的结合以及mRNA稳定性的维持等均有重要作用。 * 2、Poly A tail 大多数真核mRNA的3′末