第十六章 色谱分析法导论PPT.ppt

第十六章 色谱分析法导论 ;主要内容：;1、色谱法的产生 色谱法是一种分离技术，它是俄国植物学家茨维特1906年创立的。分离植物叶子中的色素时，将叶片的石油醚（饱和烃混合物）提取液倒入玻璃管中，柱中填充CaCO3粉末（CaCO3 有吸附能力)，用纯石油醚洗脱（淋洗）。;（1）CaCO3 吸附，使色素在柱中停滞下来。 （2）被石油醚溶解，使色素向下移动 各种色素结构不同，受两种作用力大小不同，经过一段时间洗脱后，色素在柱子上分开，形成了各种颜色的谱带，这种分离方法称为色谱法。;Tsweet的实验;色谱法中共使用两相 固定相—固定不动的相 CaCO3 流动相—推动混合物流动的液体 石油醚 色谱法：混合物在流动相的携带下通过色谱柱分离出几种组分的方法。 ;固定相： （1）固体吸附剂：CaCO3、Al 2O3等 （2）液体固定相（载体+固定液——高???点有机化合物，涂在载体上） 色谱分离法一定是先分离。后分析 一定具有两相；固定相和流动相 分离：利用组分在两相中分配系数或吸附能力的差异进行分离;色谱法的特点;气相色谱;二、色谱分析法分类;液相色谱—液体作流动相 （1）液固色谱：液体作流动相，固体吸附剂作固体相。 （2）液液色谱：液体作流动相，固定液作固定相。 超临界液体色谱——超临界流体作色谱流动相。 ;2、按操作形式分类 （1）柱色谱： 填充柱色谱—固定相填充到柱管内 毛细管柱色谱—把固定相涂在毛细管内壁上， 中间是空的。 （2）纸色谱：滤纸为固定相的色谱法，流动相是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤纸上展开进行分离。 （3）薄层色谱：把固体固定相压成或涂成薄膜的色谱法。; 3、按分离原理分类 ;色谱与光谱的区别： 色谱具有分离与分析两种功能 光谱没有分离功能;第二节 色谱过程和基本原理 ;二、色谱图中的基本术语 ;2.基线（baseline） 在实验操作条件下，色谱柱后没有组分流出的曲线叫基线。 稳定情况下，一条直线。 基线上下波动称为噪音。;3. 色谱峰（peak）是流出曲线上的突起部分。 正常色谱峰、拖尾峰和前延峰;（二） 色谱保留值——定性的依据;1.死时间(dead time) t0——不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需的时间。 ;2.保留时间tR(retention time) 组分流经色谱柱时所需时间。进样开始到柱后出现最大值时所需的时间。操作条件不变时，一种组分有一个tR定值，定性参数。;3.调整保留时间t’R (adjusted retention time)—扣除了死时间的保留时间。t’R=tR-t0又称校正保留时间，实际保留时间。 t’R体现的是组分在柱中被吸附或溶解的时间。 ;4. 保留体积VR(retention volumn)-从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大时，所需通过色谱柱的流动相体积。 ;6.调整保留体积 (adjusted retention volume)：由保留体积扣除死体积后的体积 ;1. 色谱峰的高度h(peak height)-色谱峰最高点与基线之间的距离，可用mm ,mV， mA表示。峰高低与组分浓度有关，峰越高越窄越好。 ; 2. 色谱峰面积A （peak area） ——色谱峰与基线所围的面积。 对于对称的色谱峰 A=1.065h W1/2 对于非对称的色谱峰 A=1.065h(W 0.15+W 0.85)/2 ;峰宽W（peak width）—色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离 W =4 σ 半峰宽W1/2(peak width at half height) —峰高一半处色谱峰的宽度 W1/2 =2 .354 σ W =1.699W 1/2 标准偏差σ (standard deviation)—峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。;Date;(五)分离度(resolution；R)：又称分辨率。是相邻两色 谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比。;;;三、分配平衡;影响分配系数的因素： ★ 组分的性质 ★ 固定相和流动相的性质 ★ 温度：T越大，K越小; ★ K越大，Cs越大，在柱中停留的时间越长，组分就后流出色谱柱； ★ K越小，Cs越小，在柱中停留的时间越短，组分就