定性酶免疫测定的数据处理及结果报告(湖南2005).pptVIP

免疫测定的数据处理及结果报告 卫生部临床检验中心 李金明 定性？定量？ 定性测定常以“有”或“无”也即“阳性”或“阴性”来表达测定结果；半定量测定虽介于定性和定量之间，但从严格意义上来说，其仍属于定性测定，只不过其对定性测定中的“阳性”作了进一步的分级，即所谓的强阳性·阳性·弱阳性的区别 定量测定的结果则以浓度（如IU/L、ug/L等〕的方式表达。 定性测定结果确定的依据 定性测定结果确定的依据在于阳性?阴性判定值（Cut-off）的建立， Cut-off 值的确立应尽可能地避免假阳性或假阴性结果的出现。除了 Cut-off 值以外，还有许多其它的设值方法以判断阴性和阳性结果，如S/N（常称为P/N）比值（Ratio）等。 定量测定结果的依据 系列浓度标准品测得的剂量反应曲线，即通常所谓的标准曲线。 由于定量酶免疫测定中的剂量反应曲线与生化测定中的标准曲线相比，一般均为非线性的，变异较大，故不宜称为标准曲线。 不同的数学模式可用来改善上述剂量反应曲线绘制的精密度，从而能以较少的数据和计算获得较为准确的结果 与数据处理有关的概念 准确度、标准差(SD或s)、变异系数（CV）、不精密度（重复性）、测定范围 测定下限和测定敏感性、灵敏度、特异性 阳性测定能力指数[DI(＋)]、阴性测定能力指数[DI(－)]、阳性测定的可靠性和阴性测定的可靠性 与数据处理有关的概念 标准差 适用于正态分布的标准差（SD），不能泛泛地用于酶免疫测定结果的判定。这是因为阴性参考血清的酶免疫测定值的分布常为非正态分布，呈一正向偏斜。 与数据处理有关的概念 变异系数 重复性（Reproducibility）：一般通过重复两次测定样本来观察。 测定下限（Detectability）：是指超过零剂量精密度的最低抗原浓度，可通过 t 分布（一边拖尾，因为此时曲线只有上升趋势）计算在测定下限时的吸光度值的均值差。 测定敏感性（Sensitivity): 是指一实验的测定反应对待测物质浓度变化的改变，即dR/dC。 与数据处理有关的概念 阳性测定能力指数（DI（＋））可定义为一实验对阳性标本测定后给出阳性结果的能力（通常称为“敏感性”）； DI（＋）=[真阳性/（真阳性+假阴性）]×100% 阴性测定能力指数（DI（－））则为对阴性样本测定给出阴性结果的能力（通常称为“特异性”）； DI（－）= [真阴性/（真阴性+假阳性）]×100% 与数据处理有关的概念 阳性结果的可靠性（‘预示值’）即测定为阳性的标本实际上为阳性的可能性。 =[真阳性/（真阳性+假阳性）]×100% 阴性结果的可靠性则为一份给出阴性结果的样本实际上为阴性的可靠性。 = [真阴性/（真阴性+假阴性）]×100% 测定结果的报告和数据处理 酶免疫测定数据处理报告在理想情况下应达到下述要求:(1)易于让不熟悉该试验的人所理解;(2)定性测定必须结果明确,即阳性或阴性、反应或不反应、在正常范围内或不正常等；（3）定量测定的线性；（4）数据的可重复性；（5）试验的评价不应建立在假定的正态分布上；（6）结果用于进一步分析处理（如流行病学分析）的充分性。 定性免疫测定的CUT-OFF值 “灰区”的计算 “灰区”的范围可通过计算相应于这些Cut-off值的u统计值（假设为正态分布）而得到。 例如，阴性血清的Cut-off值0.11相应于阳性血清测定值分布的均值－2.21SD，于是，一个t＝2.21相应于95.4％的可信限，因此可疑区域为 4.1％，同样，阳性血清的Cut-off值0.08相应于阴性血清测定值分布的均值+1.058SD，可得阴性的“灰区”为14.0％。 确定CUT-OFF值的方法一：标准差比率(standard deviation ratio, SDR) 预先假定一个cut-off值，然后测定大量的标本，将测定反应如吸光度（OD）值大于此假定cut-off值的弃掉 计算余下的测定反应的均值（M1）和标准差（SD1），再将超出M1+5 SD1的测定值弃去 最后计算余下的测定值的均值（M2）和标准差（SD2），以M2+2 SD2作为测定的cut-off值。 确定CUT-OFF值的方法二：测定标本对阴性比值（Test to negative ratio, TNR） 使用阴性血清测定结果均值的2或3倍作为阳性判断值 确定CUT-OFF值的方法三：均值＋2或3个SD 首先测定大量（数千）正常人血清样本，然后将所得到的吸光度均值＋2或3个SD作为阳性判断值 确定CUT-OFF值的方法四：综合阴阳性测定值考虑 如测定值为正态分布，则根据u检验，以单侧99.5%的可信限先分别确定阴性和阳性的Cut-off值；如为非正态分布，则百分位数法单侧 95％或99％来确定