hmgb1tlr4和nfκb信号通路在子痫前期中的分析-analysis of hm gb1 tlr4 and nf κ b signaling pathway in preeclampsia.docx

HMGB1/ TLR4 和 NF-?B 信号通路在子痫前期中的研究 中 文 摘 要目的：1．探讨高迁移率族蛋白（HMGB1）/TOLL 受体 4（TLR4）和 NF-?B 信号通路在子 痫前期中的可能作用；2．研究子痫前期患者血清和胎盘中 HMGB1 、TLR4 及 NF-?Bp65 的表达及其相关 性，从而探讨其与子痫前期的关系。方法：选择轻度子痫前期患者 10 例、重度子痫前期患者 20 例和同期正常妊娠组30 例作为研究对象。1．二步法免疫组织化学（SP 法）检测胎盘 HMGB1、TLR4、NF-?Bp65 蛋白的表达 变化及在组织中的定性、定位；2．逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测胎盘组织中 HMGB1mRNA、TLR4 mRNA、 NF-?Bp65mRNA 的表达变化；3．采用 ELISA 方法检测血清中 HMGB1、TLR4、NF-?Bp65 蛋白浓度。 结果：1．选取的病例在临床特征比较中，子痫前期组与对照组在年龄比较差异无统计 学意义（P0.05）；重度子痫前期组比对照组孕妇终止妊娠时间早（PO.05），轻 度子痫前期组与对照组在终止妊娠时间比较差异无统计学意义（P0.05）；子痫 前期组平均动脉压（MAP）、收缩压、舒张压、新生儿体重与对照组比较，差异有 统计学意义（P0.05）。2．免疫组化结果显示：2.1 正常妊娠组 HMGB1 主要表达于胎盘组织滋养细胞、血管内皮细胞、少量间质 细胞的胞核，HMGB1 在轻度子痫前期组及重度子痫前期组胎盘组织滋养细胞、血 管内皮细胞、少量间质细胞的胞核及胞浆表达；TLR4、NF-?Bp65 蛋白均主要表 达于胎盘组织滋养细胞、血管内皮细胞、少量间质细胞的胞浆及胞膜。2.2 子痫前期患者组胎盘 HMGB1、TLR4、NF-?Bp65 蛋白表达均较正常对照组明显 增强，差异有显著性(P0.0125)；重度子痫前期患者胎盘 HMGB1、TLR4、NF-?Bp65 蛋白与轻度子痫前期比较差异无条统计学意义(P＞O.0125)。3．RT-PCR 结果显示：3.1 子痫前期患者胎盘组织中 HMGB1mRNA、TLR4 mRNA、NF-?Bp65mRNA 表达均明 显强于正常组，差异有显著性（P＜0.05）；重度子痫前期患者胎盘 HMGB1、TLR4、 NF-?Bp65mRNA 与轻度子痫前期比较差异无统计学意义(P＞O.05)。3.2 HMGB1mRNA 与 TLR4mRNA 的表达强度呈正相关，相关系数（r=0.567，P?0.01）； HMGB1mRNA 与 NF-?Bp65mRNA 的表达强度呈正相关，相关系数（r=0.683，P?0.01）； TLR4mRNA 与 NF-?Bp65mRNA 的表达强度呈正相关，相关系数（r=0.729，P?0.01）。 4．ELISA 测定结果显示：4.1 子痫前期患者血清中 HMGB1、TLR4、NF-?Bp65 的含量较正常组明显升高，差 异有显著性（P?0.01）；且重度子痫前期患者血清中 HMGB1、TLR4、NF-?Bp65 蛋 白表达高于轻度子痫前期(PO．05)。4.2 血清 NF-?Bp65 与 TLR4 的表达强度呈正相关，相关系数（r=0.549，P?0.01）； 血清 HMGB1 与 TLR4 的表达强度呈正相关，相关系数（r=0.668，P?0.01）；HMGB1 与 NF-?Bp65 的表达强度呈正相关，相关系数（r=0.655，P?0.01）。结论：当 TLR4 识别了作为炎症因子和内源性损伤相关分子模式配体 HMGB1 时， 其下游信号通路开启，MyD88 聚集，活化 NF-?B 并转录入核，释放大量炎性因 子造成胎盘血管损伤，促进子痫前期的发生、发展，在子痫前期发病及围产儿预 后中起着十分重要的作用。关键词：子痫前期炎症反应高迁移率组蛋白（HMGB1）TOLL 受体 4（TLR4）核转录因子（NF-?Bp65）Research On The Expression Of HMGB1 /TLR4 and NF-?B Signaling Pathway In The PreeclampsiaAbstractObjective:1.To evaluate the expression and discussion on high mobility group protein ( HMGB1)/toll like receptor 4 (TLR4) and NF-?B possible role in the signaling pathway in preeclampsia.2 To evaluate the correlations between the expression of p