hlab27 pdcd1 il23r基因多态性与强直性脊柱炎的相关性研究-correlation between hlab 27 pdc d1 il23r gene polymorphism and ankylosing spondylitis.docx

华中科技大学博士学位论文 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 HLA-B27、PDCD-1、IL-23R 基因多态性与 强直性脊柱炎的相关性研究 中文摘要 强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis, AS)是一种与免疫相关的复杂疾病，受遗传 和环境等多种因素的共同影响。多个研究显示遗传因素在 AS 发病中起着十分重要的 作用。 位于 6 号染色体短臂上的人类主要组织相容性符合体 (major histocompatibility complex，MHC)是与 AS 相关的主要遗传位点。MHCⅠ编码的人类白细胞抗原 B27 (human leukocyte antigen-B27，HLA-B27)是迄今所知的、与疾病相关中最强的 HLA 抗 原。全基因组扫描发现除 HLA-B27 基因外，还有其他的非 MHC 基因参与 AS 的发病 机制，由于 AS 属于自身免疫性疾病范畴，一些和免疫相关基因与疾病的关联性研究， 已成为研究 AS 遗传背景的一大亮点，例如白介素 (interleukin，IL)基因、程序性凋亡 (programmed cell death，PDCD)基因等。然而受多种因素影响，造成这些研究结果并 不完全一致，尤其是各种基因单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphisms，SNP) 与 AS 的关系尚未完全澄清，有待进一步研究。 本课题首先采用聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction- se- quence-specific primer, PCR-SSP)法研究了中国湖北地区 HLA-B27 基因亚型与 AS 的相 关性，然后再应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性 (polymerase chain reaction- restriction fragment length polymorphisms，PCR-RFLP)技术对 PDCD-1 基因的 3 个 SNP 进行了 AS 疾病的关联研究，最后，应用 meta 分析探讨了白介素-23 受体 （interleukin-23 receptor，IL-23R）基因中 10 个 SNP 与 AS 的相关性。本研究共分以 下三部分： 第一部分 HLA-B27 基因亚型与强直性脊柱炎的易感性研究 目的：分析在中国湖北地区 HLA-B27 基因亚型与 AS 的相关性，探讨 HLA-B27 基因亚型在 AS 发病中的作用，同时评价 HLA-B27 基因亚型检测的临床意义。 方法：收集 HLA-B27 阳性的研究对象共 346 例。其中 AS 患者 190 例，男 129 名，女 61 名，平均年龄(39±9)岁，健康对照者 156 名，来男 81 名，女 75 名，平均 年龄(30±11)岁。采用病例对照研究方案，通过 PCR-SSP 进行 HLA-B27 基因亚型检 测。 结果：共检出 6 种亚型，分别是 B*2702、B*2703、B*2704、B*2705、B*2706 及 B*2713。在 AS 患者与健康对照组中，都以 B*2704 亚型（72.1%和 56.4%）为主， 其次为 B*2705 亚型（21.6%和 31.4%）,两组中均检测到频率较低的 B*2702 亚型（0.5% 和 1.3%）及 B*2703 亚型（5.3%和 8.3%），而 B*2713 亚型只在 AS 组测到 1 例（0.5%）， B*2706 亚型只在健康对照组测到 4 例（2.6%）。AS 患者组与健康对照组相比，尽管 B*2703 及 B*2705 亚型在对照组频率较高，但两组间的差异均无统计学意义（χ2=1.301， P﹥0.05；χ2=4.032，P﹥0.05），OR 值和 95%可信区分别为为 0.611 和 0.601，0.262-0.701 和 0.371-0.937。B*2704 亚型在两组中所占比例均为最高且组间存在显著性差异 （χ2=9.279，P﹤0.01），OR 值为 1.997，95%可信区为 1.279-3.119，显示 B*2704 亚型 与 AS 发病危险度相关。 结论：中国湖北地区人群中 B*2704 和 B*2705 为主要亚型，其中 B*2704 与 AS 呈强相关，B*2706 可能与 AS 呈负相关，其他低频率基因亚型与 AS 的相关性有待进 一步探讨，HLA-B27 基因亚型可作为 AS 早期诊断的重要参考指标。另外本研究所使 用的 PCR-SSP 法能检测出 29 个 HLA-B27 亚型（B*2701- B*2730，B*2722 除外），能 满足当前对 HLA-B27 基因亚型检测的需要。