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c60纳米晶体颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞raw 264.7的毒性影响word格式论文
上海交通大学 学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定, 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版,允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文.本学位论文属于必威体育官网网址口,在年解密后适用本授权书。不必威体育官网网址口。(请在以上方框内打 .J )学位论文作者叶 .J?r-指导教阳制日期: 291} 年 l 月 79日日期.叫3 年 l 月如日C60 纳米晶体颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7 的毒性影响 摘要随着纳米技术的迅速发展,各种各样形式的纳米材料正在以各种 途径进入我们的生活。富勒烯C60就是其中重要的一种。与常规的物 质相比,纳米材料具有小尺寸效应、比表面积大、反应活性高等特性。 纳米材料的广泛应用使人们开始高度关注纳米物质释放到环境中或 进入生命体后的(正面的和负面的)生物效应。本论文以小鼠腹腔巨噬 细胞RAW 264.7作为受试细胞,研究水介质中C60纳米晶体颗粒对细 胞的毒性影响作用,为正确评价C60纳米材料的生态效应提供理论依 据。本文主要研究内容包括水介质中C60纳米晶体颗粒(nC60)的制 备;nC60对小鼠腹腔巨噬细胞的毒性影响,包括其毒性检测以及毒 性机制的探讨;nC60和Cu2+对RAW 264.7细胞的复合毒性作用以及 nC60对Cu2+的吸附特性的研究。通过研究nC60以及nC60和环境中共 存污染物质如Cu2+对RAW 264.7的毒性作用,综合评价C60纳米晶体 颗粒释放到水环境中的生态风险。本文利用甲苯超声方法成功制备出黄色、透明的C60纳米晶体颗 粒水悬液。纳米粒径及Zeta电位结果表明,制备出的C60纳米颗粒表 面平均粒径为122.3nm,表面呈现负电性,Zeta电位为﹣45.24mv。受 试小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7经传代培养,其细胞活性较好,透射 电子显微镜下观察,细胞呈现圆形,细胞核染色质致密清晰,胞内细 胞器线粒体,内质网等结构较为清晰,偶有吞噬泡出现,表明其细胞I活性较好,符合实验要求。C60纳米晶体颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7的毒性研究表明,C60纳米晶体颗粒能导致小鼠腹腔巨噬 细胞死亡,当暴露nC60后,对细胞活性存在影响,呈现时间-毒性及 剂量-毒性效应关系;在nC60浓度为9.9mg/L,与细胞共培育24小时, 与对照组比较,能降低其70%细胞活性。C60纳米晶体颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7的毒性机制研 究表明, nC60所引起的RAW 264.7细胞死亡方式主要是凋亡,而不 是坏死。细胞内活性氧检测结果表明,C60纳米晶体颗粒物的暴露, 能导致其细胞内活性氧的增加,但脂质过氧化产物MDA检测结果显 示,ROS的升高并未引起细胞膜脂过氧化。导致细胞凋亡的主要原因 是细胞线粒体膜电位的降低,激活了其细胞体内的凋亡蛋白,从而引 起细胞程序性死亡—凋亡。C60纳米晶体颗粒和对Cu2+对小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7的复 合毒性研究表明,添加Cu2+后,能显著降低C60纳米晶体颗粒对小鼠 腹腔巨噬细胞的毒性作用。细胞活性检测结果表明,添加5mg/L的Cu2+ 可显著降低9.9mg/L的C60纳米晶体颗粒55%的细胞活性降低量。其主 要原因是nC60吸附了其共存的Cu2+,降低了nC60表面Zeta电位,阻碍 nC60吸附在细胞表面,从而减少了细胞表面蛋白受体传递细胞凋亡 信息。C60纳米晶体颗粒对Cu2+的吸附特性研究表明,nC60浓度及存 放时间都会影响其对Cu2+的吸附量,其中pH不仅能影响C60纳米晶体 颗粒表面Zeta电位,而且能够影响Cu2+在水中的存在形态,从而能改 变其在C60纳米晶体颗粒上的吸附量,其吸附过程符合Langmuir吸附 等温模型。关键词:C60,小鼠腹腔巨噬细胞,细胞毒性,吸附,Cu2+IICYTOTOXICITY EFFECT OF C60 NANOCRYSTALINES TO THE MOUSE PERITONEAL MICROPHAGE RAW264.7ABSTRACTWith the rapid development of nanotechnology, various forms of nanometer-scale materials are released into our daily life in various ways. Fullerene C60 is one of them. Compared to the normal materials, nanometer-scale materials have charact
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