bmcpv和bmnpv入侵的分子机制初步分析word格式论文.docxVIP

54%和98%。基于对BmCPV的一系列研究，家蚕核型多角体病毒（Bombyx morinuclear polyhedrosisvirus,BmNPV）入侵家蚕细胞时，BmNPV与细胞的相互作用蛋白之间的关系也引起我们的关注。通过查阅文献资料，我们猜想BmNPV与细胞的相互作用蛋白可能与脂筏有密切联系。用抗BmNPV病毒抗体，采用VOPBA的病毒受体候选方法并结合质谱鉴定及生物信息学分析，筛选出可能与BmNPV相互作用的蛋白，共筛选出6种蛋白，分别是肌动蛋白（actin），轻链驱动蛋白异构体-X2（kinesinlightchain-likeisoformX2），E3SUMO-蛋白连接酶PIAS3-like异构蛋白X3（E3SUMO-protein ligasePIAS3-likeisoformX3），SKI家族转录辅共阻遏物-2（SKIfamilytranscriptionalcorepressor2-like），膜联蛋白B13（annexinB13），热激蛋白90（heatshockprotein 90），类自整合障碍因子B（barrier-to-autointegrationfactorB-like）。甲基-β-环糊精（Methyl-beta-cyclodextrin，MβCD）可除去脂筏上的胆固醇，本研究用20uM的MβCD处理细胞后，荧光显微镜观察BmNPV 入侵BmN情况，结果显示与对照相比，显微镜检测不到绿色荧光。当添加外源胆固醇后，荧光被观察到。结果表明说明BmNPV入侵细胞可能也与细胞膜表面的胆固醇有关，或者与细胞膜中脂筏的完整结构有关。当用不同浓度的MβCD处理BmNPV-GFP后荧光显微镜观察显示，4uMMβCD处理的BmNPV-GFP对细胞几乎没有侵染能力。研究结果为深刻了解BmCPV和BmNPV入侵的分子机制提供了新的线索。关键词：家蚕；BmCPV；BmNPV；病毒感染；分子机制作者：王四妹指导老师：薛仁宇Apreliminaryresearchofmolecularmechanisms onBmCPVandBmNPVAbstractBombyx mori Cytoplasmicpolyhedrosisvirus(BmCPV)andBombyxmori nuclearpo- lyhedrosisvirus (BmNPV)aretwo kinds ofvirus that caninfect silkworm insericultureindustry.Thisresearchconductedfurtherresearchonthemolecular mechanismsof cell invasionbased on existing researchof BmCPV.Through bioinformaticsanalysissoftwareBmCPV9candidateproteinsforfunctionalanalysis,9kin dsofcandidate receptor proteins were initiallyscreened: CRT,CLAT,ITGB, BM KT,IPOA,AP,RACK, Gcy,OPB. Insight study into the biological function and the distributionof candidate receptors, through function of proteinbiological role, study ofviral infection insilkworm using possibleinvasiveway.In order to f urtheridentifycandidatereceptorprotein,prokaryoticexpressionrecombinantvector of CAT,IPOA, Gcy,OPB and BMKETTIN were, and the polyconal antibody wereprepared using inducible expressed recombinantprotein.Antibodyblocking experimentsconductedto explore suppressedexpressionof candidatereceptor fun ctionBmCPVproliferationofpolyclonalantibodypreparation.Bioinformaticsanalysisshowed,CRThasthreefunctionaldomains,n