api2malt1融合基因与malt淋巴瘤及其演进的关系研究word格式论文.docx

回)11 :J巴唱也相阜吐p啤但由k髓;1ζ.缩略词表APES API2 BIRbpCard3-amino-propyltriethoxylsaneinhibitorofapoptosisprotein-2 baculovirusesIAPrepeatbasepaircasp臼erecruitmentdomain3-氨基丙基三乙基旺炕惆亡抑制蛋向-2杆状病毒IAP 重复基序碱基caspase募集结构域DEPCdiethylpyrocarbonate一乙基焦碳酸盐DLBCLdiffuse largeB-celllyrophoma弥漫人B细胞淋巴瘤DTTFISHflurorescenceins血hybridization荧光原位杂交FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氨酸荧光素Hphelicobacterpylori幽门螺轩卤IHCimmunohistochemistry免疫组织化学IKKYI-kappaBkinaseI-kappaB 激酶MALTmucosa-associated lyrophoid tissue粘膜相关淋巴织织MALTlmucosa-associatedlymphoidtissuelymphoma translocationgene1粘膜相关淋巴瘤转位基冈lMALTlyrophomalow-gradeB-celllyrophomaofmucosa-associatedlyrophoidtissue粘膜相关淋巴细织米源的B细胞性淋巴瘤NF-K Bnuclearfactor K B核冈-fK BPCRpolymerasechainreaction聚合酶链式反问REALrevised EuropeanAmericanclassification淋巴样肿瘤修正的欧洲oflyrophoidneoplasms美国分类TUNELTdT-mediatedx-dUTPnickendlabelingTdT介导脱氧核甘目击缺口点;而小记ít‘回)11 ，凡事埠士唱，，1ft怜又API2-MALT1融合基因与MALT淋巴瘤及其演进的关系研究研究生:杨文秀导师:李甘地教授摘要I背景和目的l粘膜相关淋巴组织来源的B细胞性淋巴瘤是一种惰性淋巴瘤。由于缺乏特征性的免疫表型和分子遗传学标记，目前对MALT淋巴瘤的诊断仍然主要依靠临床和组织病理学特征。最近发现在MALT淋巴瘤中，由t(ll;18)(q21;q21)染色体转位导致融合基因API2-MALT1产生是多发的分子事件，认为它是低恶性MALT淋巴瘤的特征性遗传改变。从配合MALT淋巴瘤临床病理诊断的需要出发，建立完善合理的石蜡组织E队提取方法、优化检测条件、发现融合基因m卧A变异体的分布特征和地区差异对于提高检出率很有帮助。目前API2-MALT1融合基因的检测多在惰性的MALT淋巴瘤中进行，在DLBCL和一些MALT淋巴瘤相关的病变中是否有融合基因表达、表达融合基因的MALT淋巴瘤和DLBCL之间的关系尚未见到报道。基于上述研究现状，我们收集了肺、胃肠及甲状腺的MALT淋巴瘤和DLBCL以及桥本氏甲状腺炎病例，首先建立起石蜡组织RNA提取的合理万法，优化融合基因mRNA检测的RT-PCR条件。然后j通过对APl2田MALT1融合基比l多种变异体的检测，全面了解API2-MALT1融合回)11 式单啊土.恰又基因mRNA在MALT淋巳瘤、DLBCL以及桥本氏甲状腺炎中的表达情况，了解变异体的分布特征。在融合基因检测的基础上，将全部淋巴瘤病例分为API2-Mι，T1+和API2-MALT1-组，通过临床病理特征分析、免疫组化染色检查及随访，比较它们的临床病理特征(如临床病理分期、病变范围、浸润深度、淋巴结累及)和预后、肿瘤细胞凋亡和增殖活性改变以及幽门螺杆菌感染情况。研究目的在于探讨是否具有API2-MALT1融合基因转录的淋巴瘤是一个临床病理实体，并了解融合基因转录在M丛T淋巴瘤演进过程中的作用。[方法]以2001年WHO淋巴造血组织肿瘤分类为标准，通过常规HE染色观察、免疫表型(LCA、CD20、CD45RO、CD5、cycJinDl)和轻链(K、λ)限制性检查，结合临床资料，筛选出病例102例，包括MALT淋巴瘤62例、结外弥漫大B细胞淋巴瘤32例及桥本民甲状腺炎8例。1 采用TRIZOL试剂提取肿瘤组织总卧恤，通过RT-PCR 检测API2-MALT1融合基因多种变异体、API2和ωpase3的mRNA;2免疫组化检查API2、Caspase3和Ki67蛋白;3.TUNEL技术进行凋亡水平检测;4棚酸美兰染色法和半巢式PCR检测胃淋巴瘤的幽门螺杆菌感染情况; 5对全部淋巴瘤病例根据融合基因表达进行分组并进行随访分析。[结果]l.API2-MALT1融