09血液一般检查(实验诊断)实验.pptVIP

血液一般检查 河南科技大学第一附属医院检验科 手 工 计 数 法 红 细 胞 计 数 目的 ： 1. 掌握血细胞计数板的使用方法和微量吸管的吸液操作技术。 2. 掌握毛细血管采血法和显微镜红细胞计数的方法。 器材与试剂 器材： 1. 微量吸管，带孔乳胶吸头，试管，干棉球，吸管，显微镜，小玻璃棒（滴棒），绸布，小玻璃棒（滴棒）。 2. 血细胞计数盘（改良牛鲍〈Neubauer〉计数板）。 试剂： 1. 生理盐水，蒸馏水。 2. 红细胞稀释液（Hayem液）：氯化钠1.0g、结晶硫酸钠5.0g，氯化高汞0.5g、蒸馏水加至200ml。 标本： EDTA-K2抗凝全血。 操作步骤 结 果 计 算 结果计算: N — 5个中方格内细胞之和 血 红 蛋 白 测 定 氰化高铁法: 血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，后者再与氰离 子结合形成稳定的氰化高铁血红蛋白（HiCN），再比色后根 据吸光度即可求出血红蛋白浓度。 红 细 胞 计 数 临 床 意 义 生理变化 造血原料缺乏 减低 骨髓造血功能减低 红细胞破坏过多 病理变化 红细胞丢失过多 增多 相对增多 绝对增多 白 细 胞 计 数 目的: 掌握显微镜白细胞计数的原理和方法。 原理: 用白细胞稀释液(2%乙酸)将血液作一定倍数稀释也同时使红细胞完全破坏。然后充入血细胞计数板,在显微镜(低倍镜)下计数一定体积内（4个大方格）的白细胞数,经换算求出每升血液中白细胞数量. 器材与试剂 器材： 1. 微量吸管，带孔乳胶吸头，试管，干棉球，吸管，显微镜，小玻璃棒（滴棒），绸布，小玻璃棒（滴棒）。 2. 血细胞计数盘（改良牛鲍〈Neubauer〉计数板）。 试剂： 白细胞稀释液：2％冰乙酸加结晶紫数滴。冰乙酸2ml、蒸馏水98ml、结晶紫数滴混匀。 标本： EDTA-K2抗凝全血。 结 果 计 算 和 正 常 参 考 值 结果计算: N — 4 个大方格内细胞之和 正常参考值: 成年人 ( 4—10)×10 9/L 新生儿 (15—20)×10 9/L 6-24个月 (11—12)×10 9/L 白 细 胞 计 数 临 床 意 义 急性感染 组织损伤 增高 急性中毒 急性失血和溶血 恶性肿瘤及白血病 某些感染 减低 某些血液病 脾功能亢进 药物抑制造血 放射线损伤 自身免疫性疾病 白 细 胞 分 类 计 数 白细胞分类计数首先将血液在载玻片上推制成较薄的一 层血膜—称为血涂片。待干燥后用染色液进行染色，染色液 通常选用瑞氏或瑞-吉氏。染色后的白细胞均能显示其各自 的形态特征，在显微镜（油镜）下根据不同细胞的形态特征 进行分类计数。一般情况计数100个白细胞，并计算出各种 白细胞所占的比例。 同时观察各种细胞的形态（大小、外形、胞质、胞核）有无变化。 器材和试剂 试剂： 1.瑞氏染液（配制略）。 2.磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8)磷酸二氢钾0.3g、加磷酸氢二钠0.2g、再加蒸馏水至1000ml,配制成磷酸盐缓冲液调整PH,如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。 标本： EDTA-K2抗凝全血。 瑞氏染色法原理 1.瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料