色谱分析讲义.pptVIP

有机化合物色谱分析 李 迅 (O) xunlee@163.com 课程的目的和意义 色谱分析作为高效、快速、灵敏的分离分析技术，现在成为化工、生物工程、食品、医药等领域的重要分析工具。《有机化合物色谱分析》是化工学科和生物学科的一门重要专业课。 本课程的主要任务是全面学习色谱分析的基本原理、技术、仪器的基础上，着重于分析方法的应用，提高大家分析问题、解决问题的能力，提高实际操作能力，为今后在各自领域中能够独立熟练地应用色谱分析打下坚实的基础。难度 参考书 《色谱分析概论》傅若农编著 化学工业出版社 《天然有机化合物提取分离与结构鉴定》 汪茂田、谢培山等编著 化学工业出版社； 《现代色谱分析》何华、倪坤仪主编 化学工业出版社 《现代色谱分析》张祥民编著 复旦大学出版社 讲授内容 第一章 色谱分析方法导论 第二章 薄层色谱法 第三章 柱色谱 第四章 气相色谱法 第五章 高效液相色谱 第六章 毛细管电泳和超临界流体色谱法 第一章 色谱分析方法导论 第一节 概述 历史、色谱分离过程、分类 第二节 色谱流出曲线 色谱图及相关术语 第三节 色谱法基本原理 描述分配过程参数、峰间距、峰形状和峰宽的 理论描述(塔板理论及速率理论) 第四节 分离度及色谱分离方程 分离度及色谱分离方程、影响分离的因素 第一节 概述 色谱法（Chromatography） 色谱法的特点：分离效能高；分析速度快；灵敏度高；应用范围广。 历史：1906年，俄国植物学家Mikhail Tswett。 1937-1972年，15年中有12个Nobel奖是有关色谱研究的！ 色谱分离基本原理 分离原理：混合物各组分在互不相溶的两相（固定相和流动相）间具有不同的分配系数，这样就使分配系数不同的各组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按不同的次序先后从固定相中流出。 固定相：固定在玻璃管内的填充物称为固定相。 （固体或液体） 流动相：沿固定相流动的流体称为流动相。 （液体或气体） 色谱柱：装有固定相的管子称为色谱柱。 （玻璃或不锈钢制） 色谱分类方法 1. 按照产生分离过程的相系统的形式和特征分类 薄层色谱 (thin layer chromatography, TLC, 在薄板或薄膜上进行) 纸色谱 (paper chromatography, PC, 在纸上进行) 柱色谱 (column chromatography, CC，在柱子中进行) 毛细管色谱 (capillary tube chromatography, CTC, 在毛细管中进行) 色谱分类方法 2. 按照固定相类型和分离过程原理分类： 色谱分类方法 3．按照两相所处的状态分类： 第二节 色谱流出曲线（色谱图） 色谱术语 色谱术语 4）保留值 (Retention value, R)： a. 保留时间tr(Retention time)：被测组分从进样开始到柱后出现峰极大值是所需要的时间称为保留时间。 b. 死时间(Dead time, t0) ：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间。据 t0 可求出流动相平均流速 色谱术语 d. 保留体积Vr(retention volume)：从进样开始到柱后出现峰极大值时所通过的流动相的体积。 F0为流动相体积流速，即检测器出口流速（ml/min)。 e. 死体积V0(dead volume)：死体积是指色谱柱中未被固定相占据的空隙体积，即色谱柱内流动相的体积。柱外死体积。 f. 调整保留体积Vr’(adjusted retention volume)：某组分的保留体积扣除死体积后称为该组分的调整保留体积，即组分滞留在固定相中所消耗的流动相体积。 色谱术语 g. 相对保留值a2,1 (specific retention) ：组份2的调整保留值与组份1的调整保留值之比。 注意：a2,1只与柱温和固定相性质有关，而与柱内径、柱长L、填充情况及流动相流速无关，在色谱分析中用于定性的依据！ ?又称选择因子(Selectivity factor)， 反映色谱体系对组分的选择性。 a＝1、a1代表什么？ h. 净保留体积(net retention volume)和比保留体积 (specific rentention volume) J是色谱柱进口和出口之间的压力梯度校正系数 色谱流出曲线的意义 色谱峰数 = 样品中单组份的最少个数； 色谱保留值——定性依据； 色谱峰高或面积——定量依据； 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； 色谱峰间距—