第二章 遗传信息的复制.pptVIP

DNA Base Structure Structure of A G (Purines) Structure of T C (Pyrimidines) DNA Backbone: 5’-d(CGAAT) Alternating backbone of deoxyribose and phosphodiester groups Chain has a direction (known as polarity), 5- to 3- from top to bottom Oxygens (red atoms) of phosphates are polar and negatively charged A, G, C, and T bases extend away from chain, and stack on-top each other Bases are hydrophobic DNA Double Stranded Structure Polymerase Chain Reaction Prepriming involves formation of a complex by sequential association of proteins, leading to the separation of DNA strands. 酵母的复制起点（ARS） ARS(autonomously replicationg sequence) 发挥复制起点的功能，但是过量的。 酵母染色体Ⅳ的着丝粒附近为ARS1序列 ARS1分为A,B,C三个功能区, A,B起主要作用,C起次要作用。 A区为15bp,其中11个保守，称ACS (ARS consensus sequence)。有复制起始子的功能 B区约为80bp,含B1,B2,B3三个功能区。 B3是ABF1（ARS-binding factor 1）结合区， ORC：由6个亚基组成相当于Dna A和 λ的O蛋白，与 A/B1结合，结合于游离的DNA Cdc6:相当于DnaC,及λ的P蛋白，使Mcm蛋白结合到复合体上。此对在Origin上起始复制是必须的。 Mcm: DnaB 螺旋酶。即 licensing factor ABF1（转录因子）结合于B3 1.E.coli的复制终止 现已发现有两个终止区域（terE,D,A和ter C,B），位于相遇点的另一侧100bp处。每一终止顺序对某一方向移动的复制叉来说是特异的。 ter顺序有一个23bp的区域，在体外可导致复制的终止，但其功能显示了一定的方向性。 终止需要tus(terminus utilization substance)基因的产物Tus(36kD)， Tus能识别ter保守顺序，并阻止复制叉继续前进。 ter-Tus复合物可能通过抑制螺旋酶来实行终止 真核生物的复制终止 1，染色体DNA呈线状，复制在末端停止 5` 5` 5` 5` 水解、聚合、连接 5` 5` 5` 5` ? ? 2，连接不连续片段 端粒（ telomere ） 真核生物染色体线性DNA分子末端的结构 1、结构特点： 1）由末端单链DNA序列和蛋白质构成 2）末端DNA序列是多次重复的富含G、C碱基的短序列。 2、功能 1）维持染色体的稳定性 2）维持DNA复制的完整性 TTTTGGGGTTTTGGGG… 端粒酶（ telomerase） 1 一种RNA - 蛋白质的复合物 2 一种特殊的逆转录酶, 能依赖自身的RNA为模板逆转录合成端粒DNA 特点： 功能： 复制终止时，染色体线性DNA末端确有可能缩短，但通过端粒酶的作用，可以补偿这种由除去引物引起的末端缩短。 (三）DNA拓扑异构酶 （DNA topoiSOmerase） 10 8 局部解链后 拓扑异构酶作用特点： 既能水解 、又能连接磷酸二酯键 解链过程中，DNA分子会过度拧紧、打结、缠绕、连环等现象，均需DNA拓扑异构酶，改变DNA分子构象，理顺DNA链，使复制能顺利进行。 分类： 拓扑异构酶Ⅰ 拓扑异构酶Ⅱ 拓扑异构酶Ⅰ 切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结； 适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态（负超螺旋） 拓扑异构酶Ⅱ 切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛； 利用ATP供能，连接断端， DNA分子进入负超螺旋状态。 * 作用机制： 三、引物酶和引发体 引物酶 ( primase ) 在模板的复制起始部位催化NTP的聚合 , 形成短片段的RNA。这一小段RNA作