苦参提取物对小麦防御性关键酶活性的影响.pdfVIP

第9卷第5期 杭州师范大学学报(自然科学版) V01．9No．5 Journalof Normal Science 2010年9月 HangzhouUniversity(NaturalEdition) Sep．2010 DOI：10．3969／j．issn．1674—232X．2010．05．011 苦参提取物对小麦防御性关键酶活性的影响 刘姬艳1，刘如东2，胡定慧3 (1．杭州师范大学生命与环境科学学院，浙江杭州310036；2．四川省绵阳市农业局植保植检站，四川纬阳621000； 3．绵阳师范学院生命科学与技术学院，四川绵阳62IOOO) 摘要：采用水煎煮法提取苦参生物碱，以溴甲酚绿比色法测定苦参生物碱含量．用不同含量的苦参提取 物处理小麦，测定不同时间药物处理后苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)酶的活 性．结果表明：用苦参提取物处理小麦可诱导3种酶活性升高，均明显高于对照；随着处理时间的推移其活性均 呈现先升后降的趋势，且都在第7d达到峰值．苦参提取物对小麦的防御酶具有明显的诱导作用，参与小麦本身 防卫机制。提高其抗性． 关键词：苦参；小麦；防御性；关键酶活性 中图分类号：s435．129 文献标志码：A 文章编号：1674—232X(2010)05—0369—03 Flavescens 苦参(Sophora Ait)系豆科槐属植物，是我国常用的传统药物，苦参碱有清热、去湿、杀虫、 利水、抗肿瘤之功效【l。2]．近年来，随着对苦参作用机理研究的不断深化，苦参碱已经广泛应用于农药的生 产上‘引． 小麦条锈病是我国小麦生产中常见的一种病害．课题组前期研究显示，苦参提取物对小麦条锈病有很 好的防治作用(另文发表)，并对小麦条锈病菌有较好的抑制作用[4]． 文章旨在研究不同浓度苦参提取物对小麦叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(PoD)和过氧 化氢酶(CAT)等防御性关键酶活性的影响，从而认识苦参提取物提高小麦抗性的生理机制． 1 材料和方法 梓潼县植保站提供；苦参碱对照品，购于四川I维克奇生物科技有限公司，批号为110805—200507． 1．2仪器 (t-海菁华科技仪器有限公司)，自动搅拌器(上海梅颖浦仪器仪表制造有限公司)． 1．3苦参水提液的制备与定量取苦参粉100g加水煮沸1．5h，过滤得药液．沉淀重复处理3次，收集 药液，3000 r／rain离心5min，取上清液，减压浓缩药液至50mL左右，于4℃冷藏备用[5]．采用溴甲酚绿 比色法[61测定苦参碱含量．以苦参碱量浓度为横坐标，以苦参碱与溴甲酚绿反应后的溶液在420D．m处的 吸光度为纵坐标绘制标准曲线．将提取的苦参水提液与溴甲酚绿反应后同样在420nm处测吸光度，所得 收稿日期：2010—03—16 基金项目：绵阳市应用技术研究与开发项目(08Y006—1)． 作者简介：刘姬艳(1979一)，女，浙江岱山人，讲师，硕士，主要从事细胞生物学研究．E—mail：liujiyan—grace@163．com 370 杭州师范大学学报(自然科学版) 2010年 的数据代入标准曲线，计算得苦参水提液中的苦参碱含量． h后，于 1．4小麦幼苗培养和试验处理选取饱满小麦种子用75％乙醇消毒、自来水冲洗、蒸馏水浸种4 25℃的培养箱中培养．待小麦幼苗长至约1cm时，将提取的苦参液倍比稀释后分组等量喷洒，对照组用 等量蒸馏水代替，每组各3个重复．分别于喷洒后12h、1d、2d、4d、7d、11d取材测定酶活性． 1．5酶活性测定