吉林省伊通满族自治县第三中学校高中生物选修三：2.2.1 动物细胞培养和核移植技术.pptx

2.2 动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术动物细胞工程：动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合 生产单克隆抗体等对于皮肤烧伤的病人该如何治疗 动物细胞培养一、动物细胞培养概念 动物细胞培养就是从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。细胞株、细胞系细胞增殖原理：动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 取动物组织块动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质。分散成单个细胞剪碎组织胰蛋白酶处理 此处细胞在该生活环境中能无限生长和增殖吗？细胞培养细胞增殖缓慢，核型可能变化原代培养动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官剪碎胰蛋白酶单个细胞加培养液制成细胞悬浮液贴壁生长接触抑制分瓶继续培养洗涤、稀释、分离10代以内，保持正常二倍体核型传代培养10代细胞50代细胞无限传代动物细胞培养液的主要成分营 养 需 要基本营养物质：包括水、葡萄糖、氨基酸、 维生素及一些无机离子。血清： 体外培养细胞既需要上述基本营养物质，还需要促细胞生长因子等物质才能正常生长、繁殖。血清中含有多种这类物质，有利于多数细胞的存活和生长。较植物组培培养基有何独特之处？1、液体培养基2、成分中有动物血清等动物细胞培养条件1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养 （葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、维生素、微量元素、动物血清、血浆等）3、温度和PH 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.44、气体环境O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%Co2的混合气体的培养箱中进行培养维持培养液的PH值动物细胞生长特性细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。要求：有关概念原代培养： 从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。传代培养：随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖细胞系细胞株50代细胞细胞悬浮液10代细胞无限传代传代培养原代培养多数组织细胞固定在表面生长和分裂。如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系？遗传物质未改变遗传物质改变洗涤、稀释、分离50代细胞植物组织培养和动物细胞培养的比较动物细胞培养植物组织培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官离体的植物器官、组织或细胞胰蛋白酶脱分化接种至培养基单个细胞加培养液愈伤组织细胞悬浮液再分化10代细胞根、芽植物体无限传代植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的细胞的全能性细胞增殖固体培养基液体培养基蔗糖、植物激素葡萄糖、动物血清植物体细胞株、细胞系快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞动物细胞培养技术的应用生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等健康细胞培养：如获得大量自身的皮肤细胞， 用于植皮。用于检测有毒物质用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据胚胎细胞核移植：体细胞核移植：二、动物细胞核移植技术和克隆动物(一) 动物细胞核移植概念 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）细胞分化程度低，恢复全能性容易分类细胞分化程度高，恢复全能性不容易 黑面绵羊白面绵羊融合后的卵细胞早期胚胎卵细胞乳腺细胞C母绵羊子宫多利羊多利羊的培育过程2001年11月3日下午6点零5分，在莱阳农学院动物胚胎工程中心实验场，一头名叫“桂花”的黑白花奶牛，只用了15分钟，就顺利产出一头全身黑色的雌性肉牛，专家们给它起了一个吉祥的名字“康康”。重组卵细胞去核卵母细胞MⅡ卵母细胞无性生殖体细胞群体细胞乙牛受体甲牛供体代孕母牛丙（二）体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例）克隆牛（遗传物质与甲基本相同）培养去除核显微操作法取出核核植入胚胎移植移植细胞核移植物理或化学方法激活早期重组胚胎卵裂4. 过程：请看教材P48图2-21核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？用此细胞作为受体细胞有什么好处？减数第二次分裂中期卵母细胞 卵母细胞体积大，便于操作；含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。卵母细胞采集、培养MⅡ期卵母细胞去核去核卵母细胞电激处理使供体核进入受体卵母细胞构建重组胚胎供体细胞注入去核卵母细胞代孕母牛克隆牛体细胞培养供体牛体细胞核移植过程（体细胞克隆动物）胚胎移植高产奶牛（供体）供体细胞培养（受体）供卵奶牛卵母细胞培