第2章节折射旋光和圆二色性法幻灯片.pptVIP

2-2-3 旋光法和圆二色性法的应用 1.单波长旋光法 蔗糖 + 水 葡萄糖 + 果糖 酸 还原 简单体系的分析和纯度鉴定， 动力学研究 反应机理研究 2.旋光色散法 有机物结构分析 3.圆二色性法 用于蛋白质折叠、蛋白质构象研究,DNA/RNA反应，酶动力学，光学活性物质纯度测量，药物定量分析。天然有机化学与立体有机化学，物理化学，生物化学与宏观大分子，金属络合物，聚合物化学等相关的科学研究。 例1：(+)-天然樟脑构型的确定 天然樟脑(+)-樟脑可能有两种绝对构型，W. HVekel曾人为的指定它为A那样的构型，而Fredge等人却确定它为B那样的构型 。最后根据(+)-樟脑的CD和ORD谱，构型确定为A。 A O R D C D 300 400 500 600 700 ? / nm 例2：鼠肝组蛋白与尼古丁作用后的构象变化 采用紫外差谱、荧光光谱和圆二色性光谱法对鼠肝组蛋白H1和H3与尼古丁作用后的构象变化进行了体外研究. 结果表明，随尼古丁作用剂量的增加其构象逐渐由有序向无序变化，这可能是尼古丁或其代谢产物与组蛋白H1，H3发生加合。 组蛋白H1（左）、H3（右）与尼古丁作用后的CD光谱 曲线1-6尼古丁反应浓度分别为：0，0.10，0.20，0.40，0.80，1.60 mmol/L；组蛋白H1、H3的测定浓度均为0.275 mmol/L平均氨基酸残基浓度。 吴小红，孙红芳，刘元方，科学通报，1999，44，2504-2508 * * 第二章 折射、旋光和圆二色性法 参考文献 赵藻藩 等编，仪器分析，高等教育出版社，北京，1990 何金兰，仪器分析原理，科学出版社，北京，2002 刘骥 等编，医用生物物理学，人民卫生出版社，1997 Richard A. Paselk, The Evolution of the Abbe Refractometer, Bulletin of the Scientific Instrument Society, 1999, 62, 19-22, /~scimus/Essays/EvolAbbeRef/EvolAbbeRef.htm 目 录 2-1 折射法 2-1-1 折射法基本原理 2-1-2 折射仪 2-1-3 折射法的应用 2-2 旋光和圆二色性法 2-2-1 旋光法基本原理 2-2-2 旋光法和圆二色性法的仪器 2-2-3 旋光法和圆二色性法的应用 2-1 折射法 折射法 (Refractometry) 是通过测量物质的折射率来获得某些分析信息的方法。这种方法的优点是快速，设备简单。但由于折射率是物质的一种非专一的性质，所以在分析化学中的应用受到很大的限制。 2-1-1 折射法基本原理 1. 折射现象 真空：n=1 空气：n=1.00027 2. 影响折射率测量的因素 温度 n20 波长 n20D 压力 对气体折射率的影响大 3. 比折射度与摩尔折射度 辐射光束在介质中的传播速度，与其中电子的密度及电子周围的环境有关。这一情况可以通过比折射度这一参数来表征。 混合溶液的比折射度具有加合性： 比折射度： d：密度 摩尔折射度： Mr：相对分子量 m、m1、m2分别为混合液、组分1组分2的质量 4. 色散系数 nD: 钠黄光 589.3nm nF: 氢蓝光 486.1nm nc: 氢红光 656.3nm 2-1-2 折射仪 1. 折射计 np：棱镜的折射率 光源为单色光 阿贝折射计 光源为白光，利用Amici棱镜作补偿器，消除钠黄光以外光线的干扰。 1869年，Ernst Abbe搭建了第一台折射仪。 阿贝折射仪　2W.2WAJ 主要技术规格 2W 2WAJ 折射率ND测量范围 1.300-1.700 1.300-1.700 折射率ND测量准确度 0.0003 0.0002 折射率ND最小分度值 0.001 0.0005 糖量浓度(%)测量范围 0-95 0-95 糖量浓度(%)最小分度值 0.5 0.25 是测量透明,半透明液体或固体的折射率ND和平均色散Nf-Nc的仪器。并能测出糖溶液内含糖量浓度的百分数。接上恒温器则可测定液体温度在0-70℃范围内的折射率ND。 上海光学仪器五厂 2. 干涉仪 利用光干涉的原理进行测量。精度高，无可