生物化学——第三章节酶幻灯片.pptVIP

琥珀酸脱氢酶催化的反应 COOH COOH │ │ CH2 CH2 │ │ 琥珀酸 COOH CH2 丙二酸 │ COOH 利用竞争性抑制是药物设计主要思路 磺胺类药 与对氨基苯甲酸（PABA）是结构类似物 竞争性抑制细菌叶酸形成，进而抑制细菌繁殖 人通过食物中的叶酸直接补充，对人无毒害 2、非竞争性抑制 酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导致酶活性下降,称为非竞争性抑制剂。 如：某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。 （二）底物浓度对酶促反应速度的影响 在低底物浓度时, 反应速度与底物浓度成正比，表现为一级反应特征。 当底物浓度达到一定值，几乎所有的酶都与底物结合后，反应速度达到最大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。 混合级反应 混合级 一级反应 零级反应 E + S ES P + E k1 k2 k3 它们的浓度分别为[E]、[S]、[ES]、[P] 总酶浓度 [Et] 1、底物浓度对酶反应速度的影响 E + S ES P + E k1 k2 k3 2、米氏方程 Km= k2 + k3 k1 米氏常数 V= Vmax [S] Km + [S] 米氏曲线 当[S]很小时 V = Vmax[S]/Km 一级反应 V = Vmax[S] Km + [S] 当[S]很大时 V = Vmax[S]/[S]=Vmax 零级反应 混合级 讨论： 3、米氏常数（Km）的意义 Km = [S] V= Vmax[S] Km + [S] 若 V＝Vmax/2 V 2 ＝ V [S] Km + [S] 1 Km + [S] = 2[S] Km=？ 米氏常数的单位为mol/L。 米氏常数（Km）的意义 不同的酶具有不同Km值，它是酶特征物理常数，固定温度、pH、缓冲体系等条件。 同一种酶的不同的底物有不同Km值，其中Km值最小的底物为最适底物。 Km值表示酶与底物之间的亲和力：Km值大表示亲和力小，酶的催化活性低; Km值小表示亲和力大,酶的催化活性高。 酶的特征常数 与酶及底物种类有关，与酶浓度无关，可以鉴定酶。 酶 底物 Km(mmol/L) 脲酶 尿素 25 溶菌酶 6-N-乙酰葡萄糖胺 0.006 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 6-磷酸-葡萄糖 0.058 胰凝乳蛋白酶 苯甲酰酪氨酰胺 2.5 甲酰酪氨酰胺 12.0 乙酰酪氨酰胺 32.0 Km越小，亲和力越强。底物浓度很小时，反应速度就能达到很大，性能优，代谢中这类酶更为重要。 Km大小表示酶对底物的亲和力大小 Km值与米氏方程的运用 99%Vmax = Vmax [S] Km + [S] [S]=99Km 例如:要求V=99%Vmax,则[S]应为? V= 4、米氏常数Km求法 米氏方程变化 1 V = Km V · 1 [S] + 1 V V= V [S] Km + [S] 以1/V ~ 1/[S]作图( y=ax+b ) 纵截距=1/Vmax 横截距=-1/Km （三） pH 对酶作用的影响 在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适pH。 过氧化氢酶 胃蛋白酶 胰蛋白酶 精氨酸酶 延胡索酸酶 RNA酶 酶最适pH，因酶而异，大多数酶最适pH在7.0左右。 pH影响酶促反应速度的原因 1、pH太大或太小使酶变性失活，影响稳定性 2、影响酶活性部位有关基因的解离 3、影响底物的解离状态（与酶的结合力降低）。 （四） 温度的影响 温血动物体内酶最适温度：35～40℃  植物体内酶最适温度：40～50℃  微生物体内酶最适温度：40～50℃很高 大部分酶60 ℃以上变性，少数例外，细胞淀粉酶90℃时活性很高。 因此大多数酶都有一个最适温度。 在最适温度条件下,反应速度最大。 酶若制成干粉，可放置在室温下保存，而处于溶液状态时必须放在冰箱里保存。 原因何在？ 低温无水使微生物降解酶的活性低 实际应用——贮存酶制剂 （五）激活剂对酶作用的影响 凡能提高酶活力的物质都称为酶的激活剂。 1、金属离子或其它无机离子 阳