血管基膜衍生多功能肽基因克隆表达及空间构象分析悦造燥灶蚤灶早.PDFVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 摇 圆园园猿 杂藻 ；员园（猿）：员愿缘耀员愿怨 悦澡蚤灶 允 悦葬灶糟藻则 月蚤燥贼澡藻则 ·员愿缘 · ［文章编号］摇 员园园苑鄄猿愿缘载（圆园园猿）园猿鄄园员愿缘鄄园缘 血管基膜衍生多功能肽基因克隆、表达及空间构象分析 彭淑平，方唯意，戴文建，邹小青，刘红英，石书红，曹建国（南华大学肿瘤研究 ，湖南衡阳摇 源圆员园园员） ［ 摇 要］摇 目的：构建血管基膜衍生多功能肽克隆和原核表达载体，并对血管基膜衍生多功能肽氨基酸序列进行空间结构 分析预测。方法：用人源性陨早郧猿上游铰链区连接肽连接的栽怎皂泽贼葬贼蚤灶 的圆个功能区片段，即血管基膜衍生多功能肽（灾月酝鄄 阅酝孕），利用合成的猿条长引物片段，进行孕悦砸扩增。克隆到 哉悦员怨载体，酶切和测序鉴定。亚克隆构建原核表达载体 郧耘载鄄 源栽鄄员鄄灾月酝阅酝孕，陨孕栽郧诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达产物。用郧造怎贼葬贼澡蚤燥灶藻杂藻 澡葬则燥泽藻源月层析柱进行了亲和层析鉴定。 将灾月酝阅酝孕序列输入计算机，利用粤灶贼澡藻 则燥贼软件分析。结果：血管基膜衍生多功能肽（灾月酝阅酝孕）基因经限制性内切酶酶切 和测序鉴定，其大小和核苷酸序列正确，与设计完全一致。获得了原核表达融合蛋白郧杂栽鄄灾月酝阅酝孕。粤灶贼澡藻 则燥贼分析显示，人 陨早郧猿上游铰链区连接后的栽怎皂泽贼葬贼蚤灶 的圆个功能区域能自由伸展。结论：成功构建了血管基膜衍生多功能肽克隆和原核表达 载体，并对其进行了空间结构分析。 ［关键词］摇 血管基底膜；衍生肽；陨早郧猿上游铰链区；栽怎皂泽贼葬贼蚤灶；原核表达；空间构象 ［中图分类号］摇 砸猿员愿摇 摇 摇 摇 ［文献标识码］摇 粤 悦造燥灶蚤灶早，耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬灶凿 杂责葬糟藻 悦燥灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 灾葬泽糟怎造葬则 月葬泽藻皂藻灶贼 酝藻皂遭则葬灶藻鄄阅藻则蚤增藻凿 酝怎造贼蚤枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 藻责贼蚤凿藻 孕耘晕郧杂澡怎鄄责蚤灶早，云粤晕郧 宰藻蚤鄄赠蚤，阅粤陨 宰藻灶鄄躁蚤葬灶，在韵哉载蚤葬燥鄄择蚤灶早，蕴陨哉匀燥灶早鄄赠蚤灶早，杂匀陨 杂澡怎鄄澡燥灶早，粤韵 允蚤葬灶鄄 早怎燥（葬灶糟藻则 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 晕葬灶澡怎葬 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，匀藻灶早赠葬灶早源圆员园园员，澡蚤灶葬） ［粤遭泽贼则葬糟贼］摇 韵遭躁藻糟贼蚤增藻：栽燥 糟燥灶泽贼则怎糟贼 糟造燥灶蚤灶早 葬灶凿 则燥噪葬则赠燥贼蚤糟 藻曾 则藻泽泽蚤燥灶 增藻糟贼燥则 燥枣 增葬泽糟怎造葬则 遭葬泽藻皂藻灶贼 皂藻皂遭则葬灶藻鄄凿藻则蚤增藻凿 皂怎造贼蚤枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 藻 贼蚤凿藻 葬灶凿贼燥葬灶葬造赠扎藻蚤贼泽泽 葬糟藻糟燥灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶援 酝藻贼澡燥凿泽：灾葬泽糟怎造葬则遭葬泽藻皂藻灶贼 皂藻皂遭则葬灶藻鄄凿藻则蚤增藻凿皂怎造贼蚤枣怎灶糟鄄 贼蚤燥灶葬造 藻 贼蚤凿藻（灾月酝阅酝孕）泽藻择怎藻灶糟藻 燥遭贼葬蚤灶藻凿 遭赠 燥造赠皂藻则葬泽藻 糟澡葬蚤灶 则藻葬糟贼蚤燥灶 憎葬泽 糟造燥灶藻凿 蚤灶贼燥 增藻糟贼燥则 哉悦员怨援 宰藻 葬造泽燥 泽怎遭鄄 糟造燥灶藻凿 蚤贼 蚤灶贼燥 则燥噪葬则赠燥贼蚤糟藻曾 则藻泽泽蚤燥灶增藻糟贼燥则 郧耘载鄄源栽鄄员援 栽澡藻则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼憎葬泽糟燥灶枣蚤则皂藻凿遭赠则藻泽贼则蚤糟贼蚤燥灶藻灶凿燥灶怎糟造藻葬泽藻凿蚤早藻泽鄄 贼蚤燥灶 葬灶凿 葬怎贼燥鄄泽藻择怎藻灶糟藻则援 郧耘载鄄源栽鄄员鄄灾月酝阅酝孕 憎葬泽 贼则葬灶泽枣燥则皂藻凿 蚤灶贼燥 耘援 糟燥造蚤 允酝员园怨 园援员 皂皂燥造辕 蕴 陨孕栽郧 糟葬灶 蚤灶凿怎糟藻 澡蚤早澡 藻曾 则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 郧杂栽鄄灾月酝阅酝孕援 郧杂栽鄄灾月酝阅酝孕憎葬泽燥遭贼葬蚤灶藻凿遭赠 郧造怎贼葬贼澡蚤燥灶藻杂藻 澡葬则燥泽藻源月糟燥造怎皂灶泽援栽澡藻 泽 葬糟藻糟燥灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 燥枣 灾月酝阅酝孕 憎葬泽 则藻凿蚤糟贼藻凿遭赠怎泽蚤灶早糟燥皂 怎贼藻则 则燥早则葬皂粤灶贼澡藻 则燥贼援 砸藻泽怎造贼泽：栽澡藻则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼灾月酝阅酝孕早藻灶藻糟燥灶枣蚤则皂藻凿遭赠 则藻泽贼则蚤糟贼蚤燥灶 藻灶凿燥灶怎糟造藻葬泽藻 凿蚤早藻泽贼蚤燥灶 葬灶凿 葬怎贼燥鄄泽藻择怎藻灶糟藻则 憎葬泽 糟燥灶泽蚤泽贼藻灶贼 憎蚤贼澡 泽藻择怎藻灶糟藻 憎藻 凿藻泽蚤早灶藻凿援 栽澡藻 澡蚤早澡 藻曾 则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 郧杂栽鄄灾月酝阅酝孕 憎葬泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠园援员