乙型肝炎血清学和分子生物学检测技术PPT.pptVIP

乙型肝炎病毒血清学和分子生物学检测技术;乙肝病毒研究历史;*; 病毒形态与基因结构;结构和基因;HBV基因组和基因表达产物;;机体感染HBV后产生相应的免疫反应，形成多种不同的抗原抗体系统 表面抗原抗体系统 (HBsAg，抗-HBs) e 抗原抗体系统 (HBeAg，抗-HBe) 核心抗原抗体系统 (HBcAg，抗-HBc) ; HBsAg 最早出现的血清学标志之一 是HBV感染的基本标志 HBsAg阳性见于 乙肝的潜伏期、急性期 慢性乙肝 病毒携带 与HBV感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌 ;抗-HBs 特异性中和抗体、保护性抗体 抗-HBs阳性可见于 乙型肝炎恢复期，在HBsAg消失后间隔一定时间抗-HBs出现隐性感染的健康人，自身产生了免疫力 注射乙肝疫苗或乙肝高效价免疫球蛋白(HBIG)后，产生的主动或被动免疫;HBeAg 与HBsAg平行出现，较HBsAg消失早 意义 体内HBV复制、传染性强的标志 急性乙型肝炎的辅助诊断 判断预后的指标：HBeAg转阴，表示HBV复制减少或终止，预后好；若HBeAg持续阳性，则预后不良，易转为慢性 抗-HBe HBeAg消失后出现无症状HBV携带者及非活动期慢性肝炎患者表示HBV在体内复制减少或终止，传染性减弱或消失 ;HBcAg 不能从血清中直接检出 Dane颗粒经去垢剂处理HBcAg释放检测 抗-HBc 非中和抗体、分IgM和IgG 主要见于慢性感染和既往感染 抗-HBc IgM 通常在出现症状时即可检出，一般持续约6个月，提示HBV 复制，是急性感染的重要指标，也是慢性活动性肝炎的重要标志 抗-HBc IgG 在抗-HBc IgM下降及消失后出现，可伴随感染者终生存在 临床机构一般常规检测抗-HBc ，但检测抗-HBc IgM相对较少（乙肝6项）。 ;IgM anti-HBc;;HBV感染血清学常见模式;*;乙型肝炎的生物化学检测;方法学的发展 ELISA：灵敏性高，成本低，适用于普通病人筛查； 胶体金免疫层析法(金标法)：简便易行，可用于急诊病人快速检测或无偿献血人员粗筛检测HBsAg； 化学发光法定量检测：价格昂贵，可用于HBVMs为临界值的病人的确证；在评价抗病毒治疗的病毒学应答、疗效和判断预后方面有重要意义。 新增检测指标 Pre–S1抗原等 ; HBV基因型和基因变异研究： 必要性 主要方法 HBV-DNA病毒载量测定： PCR结合荧光探针技术 病毒复制水平最可靠，最直接的证据，与传染性和疾病进展密切相关； 主要用于HBV感染的判断，治疗适应症的选择及抗病毒疗效的判断。 HBV耐药突变的检测 ;病毒基因突变;乙肝病毒基因分析技术路线;M; ;ELISA （最常用，定性） 免疫层析法（胶体金或硒标法） 发光免疫分析（定量) ;ELISA检测实验室配备基本仪器; 抗-HBcIgM 酶免检测 收样：血清标本 收样登记表： 抗-HBc IgM 1:1000标本检测登记表.doc（县级需检测） 慢性乙型肝炎血标本送检表.doc （县级不必检测） 样品整理、编号 样本保存：标本宜新鲜时检测，若5天内检测，可使用冰箱2～8℃保存，超过1周测定，应-20 ℃保存 检测项目：抗-HBc IgM 检测时限：每月10日前完成上月标本检测 检测试剂： 省统一购置，分次到省疾控免疫所肝炎实验室领取。 试剂储存： 2～8℃保存，注意效期 结果反馈 ; 抗-HBc IgM 1:1000标本检测登记表 （乙肝监测项目用） . 省（直辖市） 市 县（市、区） 试剂生产厂家：; 慢性乙型肝炎血标本送检表 （乙肝监测项目用） . 省（直辖市） 市 县（市、区） 标本送