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番茄红素培养酵母的生物学效应研究 　　摘要：以酵母菌为材料，在固体和液体培养基中添加不同浓度的番茄红素，进行４轮连续培养，对所得后代测定多种生理生化特征。结果表明，培养基中番茄红素浓度在５０ｍｇ／Ｌ以下时，随着番茄红素浓度的增大，酵母菌细胞的体积、繁殖能力和内含物含量均增长；当超过这一浓度后，上述特征都有所下降。 　　关键词：番茄红素；啤酒酵母；生物学效应 　　中图分类号：Ｑ４９３．９９文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11405－0921-03 　　 　　The Biologic Effect of Lycopene on Cultured Saccharomyces cerevisiae 　　 　　ＺＨＡＮＧ Ｑｉａｎ，ＺＨＡＮＧ Ｊｉａｎ－ｍｉｎ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： The physiological characters of yeast after 4 generations of continuous cultivation in solid and liquid medium added with different concentrations of lycopene such as 0，10，20，30，40，50 and 60 ｍｇ／Ｌ were assayed. Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｃｏｐｅｎｅ ｗａｓ ｂｅｌｏｗ ５０ｍｇ／Ｌ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ， ｔｈｅ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ａｂｉｌｉｔｙ， ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｖｏｌｕｍｅ， ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍａｎｙ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｏｆ ｙｅａｓｔ ｗｏｕｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｗｉｔｈ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ｌｙｃｏｐｅｎｅ ｓｕｐｐｌｙ． Ｂｕｔ ｔｈｅｓｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｉｎｄｅｘｅｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｌｙｃｏｐｅｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｅｘｃｅｅｄ ５０ ｍｇ／Ｌ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｌｙｃｏｐｅｎｅ； Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ； ｂｉｏｌｏｇｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ 　　 　　番茄红素是一种类胡萝卜素，主要存在于番茄等其他新鲜蔬菜中。研究发现，番茄红素清除自由基的能力最强，是胡萝卜素的２倍多，是维生素Ｅ的１００多倍［１－３］。不少专家认为番茄红素在肿瘤的预防和治疗中可能起着决定性作用［４－７］。此外，它还具有保护心血管、增强机体免疫力、保护皮肤等多种生物学功能［８，９］，因而番茄红素广泛用于食品、医药和化妆品领域。本研究以酵母为材料，将一定浓度的番茄红素加入到酵母培养基中，对多轮培养后代进行生理生化指标测定，以探讨番茄红素对酵母的生物学效应，为合理利用番茄红素提供理论依据。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　啤酒酵母，来自山东大学威海分校微生物学实验室。 　　番茄红素，纯度８０．５％，橙红色粉末，购自绿谷生物制品有限公司。 　　液体基本培养基：马铃薯培养基灭菌后分装入６０ｍＬ三角瓶中，每瓶３０ ｍＬ培养液；固体基本培养基：在上述液体基本培养基中添加２％琼脂，倒入培养皿中；处理培养基：在基本培养基中按不同浓度添加番茄红素，浓度分别为：０、１０、２０、３０、４０、５０、６０ ｍｇ／Ｌ。依据各种浓度将配制成的固体培养基分别接种于７只培养皿中，用于菌落的培养；液体培养基分别接种于７只三角瓶中，用于菌悬液培养和生长量的检测。 　　１．２方法 　　酵母菌种先进行液体活化，待液体中菌细胞密度达到１０６个／ｍＬ时，取０．１ ｍＬ活化的酵母菌转入１０ ｍＬ无菌水中制成菌悬液，每次吸取０．１ ｍＬ注入液体培养基中、摇匀，在２６±１，５０ ｒ／ｍｉｎ条件下摇床培养；同时吸取０．１ ｍＬ菌悬液注入固体培养基平板上，涂布均匀，培养３ ｄ。随后分别从第一轮培养所得各处理组和对照组的酵母菌悬液中取０．１ ｍＬ重复上述步骤，继续培养即为第二轮，记为Ｒ２。以此方法再连续培养２轮，分别记为Ｒ３、Ｒ４。每轮所得的酵母菌的菌落或菌悬液除了接种下一轮外，其余均用于生理和生化指标的测定。 　　１）酵母细胞直径的测量。从摇匀后的各种处理和对照组的菌悬液中吸取一滴菌液，置于干净的载玻片上，盖上盖玻片，以显微测量技术测定酵母菌细胞的直径，各种处理和对照均测定２０个细胞，计算平均数。 　　２）菌悬液细胞密度的测定。从摇匀后的各种处理和对照组的菌悬液随机吸取一滴，置于干净的血球计数板上，利用血球记数法统计菌悬液中细胞密度，测定２０次，计算平均数。 　　３）可溶性糖含量测定。在固体培养基上用干净盖玻片刮取０．１ ｇ鲜酵母，快速研磨，加入２５ ｍＬ去离子水，转移至５０ ｍＬ锥