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nlrp3炎性体与类风湿关节炎的相关性研究
NLRP3炎性体与类风湿关节炎的相关性研究 [摘要] 目的 探讨NLRP3炎性体与类风湿关节炎的相关性。 方法 选取2015年1~12月我院收治的类风湿关节炎患者(RA)40例为研究组,同时选取同期健康体检人员40例为对照组,比较两组研究对象外周血NLRP3、半胱天冬酶-1(CASP1)以及凋亡斑点样蛋白(PYCARD)mRNA表达水平。 结果 研究组的NLRP3表达显著低于对照组,同时CASP1以及PYCARD表达显著高于对照组,差异均有统计学意义(P [关键词] NLRP3炎性体;类风湿关节炎;自身免疫性疾病;相关性 [中图分类号] R593.22 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2017)11-0008-03 Study on the correlation between NLRP3 inflammasome and rheumatoid arthritis SONG Xiandong1 LI Yang2 LIU Bo1 YAN Zhaowei1 ZHU Min3 1.Department of Second Orthopedics, Hongqi Hospital Affiliated to Mudanjiang Medical College, Mudanjiang 157011, China; 2.Department of First Orthopedics, Hongqi Hospital Affiliated to Mudanjiang Medical College, Mudanjiang 157011, China; 3.Department of Radiology, Hongqi Hospital Affiliated to Mudanjiang Medical College, Mudanjiang 157011, China [Abstract] Objective To investigate the relationship between NLRP3 inflammasome and rheumatoid arthritis. Methods Forty patients with rheumatoid arthritis(RA) admitted in our hospital from January to December 2015 were chosen as study group. 40 healthy subjects in the same period were selected as the control group. The mRNA expression levels of NLRP3, caspase-1(CASP1) and apoptotic spot-like protein(PYCARD) in peripheral blood between the two groups were compared. Results The expression of NLRP3 in the study group was significantly lower than that in the control group, and the expressions of CASP1 and PYCARD were significantly higher than those of the control group(P0.05),均知情同意本研究,并经过医院伦理委员会批准。 1.2 方法 1.2.1 RNA提取与合成 抽取患者的外周静脉血3 mL,使用肝素钠进行抗凝,应用人淋巴细胞分离液分离单个核细胞,然后应用Trizol试剂,根据说明书提取RNA,添加RNA酶水进行溶解[2]。取5 mL RNA样品进行糖凝胶电泳,在糖凝胶图谱中显示18S、28S以及5S条带。紫外分光光度检测RNA在280 nm 以及260 nm波长位置的吸光度(A)值,计算A260/A280比值。cDNA的合成根据逆转录试剂的操作说明进行[3]。 1.2.2 NLRP3、CASP1以及PYCARD基因检测 应用对照组以及研究组的cDNA建立30 μL的反应体系,实现PCR扩增,在-10℃条件下保存,扩增产物应用1%糖凝胶电泳进行检测,使用曝光机曝光拍摄PCR条带图像,应用软件测定灰度值,采用灰度值比表示mRNA的表达[4]。 1.2.3 PCR产物的纯化以及测序 PCR产物在经过凝胶电泳纯化后,回收目的片段,将回收的目的基因再次凝胶电泳分析,核实存在条带后测定目的基因片段的核酸序列[5]。 1.2.
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