10M.G.第四章 细菌基因转移和基因重组、3，4节 微生物遗传 教学课件.pptVIP

第四章、细菌基因转移与基因重组 第三节、转导 第四节、放线菌遗传 第三节、转导 一、普遍性转导 1、转导现象的发现 2、普遍性转导噬菌体及转导机制 3、普遍性转导在遗传分析中的应用 二、局限性转导 1、局限性转导机制及低频转导（LFT） 2、高频转导(HFT) 三、普遍性转导与局限性转导的比较 转 导 (Transduction) Transduction is the term used to designate the bacteriophage-mediated transfer of DNA from one cell (a donor ) to another cell (a recipient). 转导是以噬菌体作为媒介，将一个细菌的基因导入另一个细菌的过程。 普遍性转导（Generalized transduction） 转导的DNA为供体菌基因组DNA的任何随机片段。分为： 流产转导（Abortion transduction），如P22 共 转 导（Cotransduction），如P1 局限性转导(Specialized transduction) 噬菌体专一性转导宿主染色体附着位点附近的一段DNA或少数几个基因。如噬菌体λ。 分为：低频转导 高频转导 1、转导现象的发现 1952年，Zinder , Lederberg 实验材料为沙门氏菌属的2株菌： LT22A: trp - his + (p22) LT2: trp + his – 杂交实验： LT22A x LT2 trp + his + （机率为10－5） 转导的证明 1、用U型管将2个菌株隔开，仍有重组子出现，证明不是接合作用。 2、分析“可滤过因子”，对DNase不敏感，与噬菌体p22有相同的质量大小、相同的血清型反应。 因此证明重组子出现与噬菌体p22有关。 2、普遍性转导噬菌体及转导机制 普遍性转导噬菌体有 p22 和 p1，特点是： 1）噬菌体感染进寄主后，不将寄主染色体完全降解，而是切割成较大的片段。 2）噬菌体p22识别包装位点（packaing site, 简称pac序列）的特异性不高。 3）噬菌体p1在寄主中包装时，不要求pac序列，只认长度，转导的基因范围更具随机性。 P22转导颗粒的形成 p.104,图4-17,4－18, 转导机制－错误包装 图7.16 p1转导过程 3、普遍性转导在遗传分析中的应用 利用流产转导进行功能互补测验 图5.7 二、局限性转导 1、局限性转导机制及低频转导 Campbell Model: λDNA在组入细菌染色体之前形成环形分子。 Prophage 从染色体上切离时，会发生交换重组，带上寄主的基因，形成转导噬菌体。（图5－8） 低频转导形成的转导子（图5－42） 1/3为非溶源性的、稳定的转导子 2/3为缺陷溶源性的转导子，称为“杂基因子”。 2、高频转导 高频转导的条件：双重溶源 见图5－43 三、普遍性转导与局限性转导的区别 第四节、放线菌遗传 一、链霉菌染色体DNA 二、链霉菌的接合作用 基因重组的发现 链霉菌的性别体制和基因重组 一、链霉菌染色体DNA 1、特征： 一条染色体，DNA为线性，基因内部无内含子，平均大小为8Mb，约含7000个基因。 染色体的2个末端具有很长的反向重复序列，简称TIR ( terminal inverted repeat),TIR通常的长度为24～600Kb。 每条DNA链的5’端都有共价结合蛋白，简称TP (terminal protein)。TP与TIR组成的复合体结构称为端粒(telomere)。 复制起始位点位于染色体的中央，从该起点进行双向复制。（p.140 图6－1） 2、链霉菌染色体的缺失、扩增和重排 染色体的缺失：链霉菌在生长发育过程中会自发的丢失部分染色体，而失去某些功能基因。缺失最多可达2000 kb以上。 染色体的扩增：染色体某些区段的DNA序列，其拷贝数专一性的大量增加的现象。 AUD (amplified uni