小鼠造模，四诊检测，病理学组织固定、包埋、切片、染色，检测。.pptVIP

* 一、教学目的和要求 （一）实验流程的介绍 1．今天课程的内容安排 主要是预初实验，包括： （1）有关理论知识学习。 （2）掌握实验准备的基本方法。 （3）掌握各实验方法的预实验。 （4）掌握小鼠四诊检测的方法与技术。 2．下一次（3/14）实验课程安排（直接去实验教学中心） 内容包括： （1）正式教学实验开始：在老师指导下，动物四诊检测，并开展造模。 1）在教师的指导下，参考预初实验，集中对30只小鼠实施造模，10只作正常对照。 2）中药完成制备，并给药。 3）按照计划，小鼠的证侯发生及其演变的观察、记录。 （2）其他组别学生，继续实验准备和各实验方法的培训，为后续实验准备。实验前准备：包括准备4套相应的实验器材和有关试剂、容器、材料，放在相应的实验台上；显微镜、匀浆器、试管和试管架等也准备到位。所有实验方法掌握，并能够熟练运用。 3．再下两次（3/21-3/28）课程内容安排（直接去实验教学中心） 第一次（3/21） （1）上午，第一组同学，去动物房小鼠四诊检测。 （2）中午12:30，全体同学一道，处死实验小鼠，取材。具体分工如下： 切取肝脏，抽提RNA ，等。 4 处死实验动物，收集血液标本、血涂片，等。 3 取材，并分离实验动物后肢股骨，取骨髓，骨髓涂片，等。 2 配合取材（胸腺、脾、肝、胃、小肠。以及心、肾、睾丸有关组织称重），病理组织固定、修块、包埋、切片、染色、封片，等。 1 实验内容 组别 （3）在老师的指导下，各检测研究同步展开，多手段检测不同组别实验动物有关指标的改变，综合实验开展和有关能力的训练。 具体分工如下： 肝、小肠、胃粘膜病理 中药制备，给药；白蛋白RTPCR、葡萄糖醛酸基转移酶。 梁超 管冬元 4 肝、小肠、胃粘膜病理 血清白蛋白、总抗氧化能力等生化测定。 宋菊敏 刘小美 3 脾、胸腺病理 小鼠造模，四诊检测和辨证；骨髓涂片、血涂片。 潘志强 2 舌与舌苔，小肠、胃粘膜病理 小鼠造模，四诊检测，病理学组织固定、包埋、切片、染色，检测。 卢文丽 1 实验内容二 实验内容一 指导老师 组别 在老师的指导下，在适当时间对标本进行处理，包括生化、分子生物学指标检测，组织、血液和骨髓涂片的固定、包埋、切片、染色、封片、观察、记录，等；以及相应的统计处理。 此后几天内学生将利用课余时间和晚上开展相应实验。主要用于组织的包埋、染色。 第二次（3/28） 继续实验。此时，所有病理切片和染色已经完成，各组同步开展读片工作。 部分实验要求： （1）要求详细的实验记录：时间、内容、方法、结果、对结果的分析、实验人员签名。 （2）关于读片 读片注意：形态（组织结构、细胞形态、胞浆和细胞核）的异同，颜色的异同。以往的问题：观察不仔细，把握不住细胞的形态，有了变化却视而不见。关键在准备不够充分。 结果可以绘图，可以拍照。要求把有关结构、内容标记清楚。要有文字说明，如：“图1，脾脏，HE，×400”。 以下将专门介绍。 （3）关于数据处理 实验数据要求处理。要求提供均数和标准差，以及各个组别的差别。差别要求明确其统计意义。 常规统计方法，如卡方检验、方差分析等。 处理过的数据可以列表，通常是3线简表，或直方图类。 有关图的选用，常用的是直方图，如果反映时间变化的，比如不同时段体重的变化，可以用曲线图。常用的还有散点图等。目的是清晰易懂。 以往的问题。集中在统计方法不对，以及表格和图的使用不当。 （4）关于态度和精英教育 鉴于教学条件和安排，没有要求每一个同学开展所有实验。但是，如果可能的话，在完成各自负责的实验项目的基础上，请主动参加所有实验，充分利用这样宝贵的学习、锻炼机会。投入多，收获多。 4．实验结果统计处理，形成PPT 4/5的课，各小组推荐1人准备实验结果课堂介绍。其他小组记录，并作为研究报告撰写时的参考内容。 介绍实验结果的目的 （1）作为介绍实验结果能力的培训。怎样把结果有序、准确、精炼地介绍给大家。 （2）互通信息。由于不是人人参与了所有实验，具体个人往往对其他同学的实验结果不了解，这样在分析自己实验结果时容易造成偏差。盲人摸象。这也是为什么鼓励综合实验的目的，即综合地分析所有数据，联系而不是孤立地看待问题和数据，得到更贴近实际的结果。 （3）为了达到介绍的最佳效果，要求可能的话制作PPT。 （二）今天的课程和预初实验 1．上午 （1）今天和后续课程的总体介绍。 （2）观看小鼠四诊和辨证方法，以及整个实验过程的DVD课件，了解实验的基本方法