慢性粒细胞白血病的分子生物学实验诊断研究进展.docVIP

精品论文 参考文献 慢性粒细胞白血病的分子生物学实验诊断研究进展 （遂宁市中心医院血液科 四川遂宁 629000） 　　【摘要】近年来，分子生物学技术呈飞跃式发展，bcr/abl的研究也在不断精进，并且有望评释慢性粒细胞白血病（CML）的病发原理。分子生物学的应用对促进CML诊断有效性具有积极的指导作用。当前通过借助分子生物学技术，以期待对CML医治达到根治的效果，该技术的开展为CML的临床医治提供了新思路。 　　【关键词】慢性粒细胞；白血病；分子生物学；实验诊断 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）12-0001-01 　　慢性粒细胞白血病（CML）属于一种骨髓性增生病症，其病发于骨髓干细胞。该病可发生于任意年龄段，并且具有起病较慢，初期症状特异性差等特点。因此，大多数患者早期都不易有所察觉。实验室对CML的诊断通常划分成细胞化学染色、细胞遗传学Ph染色体、急变期的免疫分型检测、骨髓象以及血象的细胞形态学诊断等。本文就分子生物学实验诊断在CML的应用进行阐述。 　　1.bcr/abl基因 　　Ph染色体是CML的细胞遗传学标记。其是由9号与22号染色体，借助长臂间的互相易位而构成的。通过染色体易位，可使处于22q11上的bcr基因与处于9q34上的c-ABL原癌基因发生融合。然后生成bcr/abl融合基因，因此其被认为是CML的一大特点。bcr/abl基因能够将异常mRNA转录出来，然后进一步解释成分子量为210 KD的蛋白质。该蛋白质是一种酪合蛋白，其拥有浓度较高的酪氨酸激酶活性。因此，能够致使细胞调控系统紊乱，并对抑制胞调亡具有显著的效果。bcr/abl融合基因在表达过程中，可致使细胞不依赖细胞因子而实现无限繁殖。因此推断，此无限繁殖代表正常细胞正逐步向白血病细胞恶性发展。有学者研究发现[1]，74例CML病人通过检测，bcr/abl基因呈阳性69例，计算可知阳性率高达95%。据此推断，存在9/10以上的CML病人，能够检出bcr/abl融合基因。故bcr/abl基因的m-RNA可被用作CML病人的分子标记。 　　不管是Ph染色体，还是bcr/abl mRNA，均能够将其用作对CML进行诊断的特征性标记。2者都能够存在于患者的白血病细胞中。借助细胞遗传学方法，对患者的Ph染色体进行检测，白血病细胞一般不会低于10%。但当CML得到完全缓解时，患者机体内部的残留白血病细胞通常不超过5%。对于施行慢CML骨髓移植的病人，由于其体内所残留的白血病细胞会显著减少，此时采用形态学以及细胞遗传学进行检测，检测结果往往会不理想，且十分不易被检测出来。RT-PCR检测bcr/abl基因的敏感性。在推断医治疗效，检测残留病变，预测复发以及编制下一阶段施治方案等方面均十分有益。通过RT-PCR检测bcr/abl基因，对患者的复发可能性进行预测。可尽早对潜在复发概率较高的病人，介入干扰素进行医治。 目前，人们对所有bcr基因与部分abl基因的核苷酸序列已有清晰的认识。但对于2者融合的确切因素以及知识导致CML病发的原理还未能够做出详尽的说明。不过仍能够确定的是bcr/abl基因检测的灵敏度，远远超过Ph染色体的检测敏感性。故可将bcr/abl基因作为诊断CML的标志性基因。此外，bcr/abl基因重排，对CML病人骨髓移植后进行追踪检测有无残留病变，具有推断预后的作用。若移植后的检测发现bcr/abl基因存在，即提示疾病复发率有提升倾向。从而有助于选择更为积极的医治措施，以促进预后的改善。 　　2.降钙素基因 　　虽然bcr/abl基因能够用作诊断CML的分子生物学标志，但其与疾病进行性发展的关联性不大。因此，无法诊断出CML的进展情况。而处于11号染色体11p25 的降钙素基因，其5端高度甲基化与血液系恶性病症存在密切的关系。降钙素基因,可被称之为降钙素/alpha;-降钙素基因相关肽基因。其可转译成CT以及alpha;-CGRP。CT基因高甲基化与CML的病期存在关联性。通过不间断的观察CT基因高甲基化状态，可有助于对CML病情进展情况进行监测。CML病发初期，降钙素基因甲基化的程度表现较低，但随着病情的进行性发展，其程度呈逐步提高趋势。在CML稳定期CT基因甲基化一般处于正常水平，但若偶然发现其发生变化，则预示着患者的病情将于几个月后，会进入到急变阶段或者恶变加速阶段。相关研究报道[2]，CML患者出现CT基因甲基化增高属于病情进展为急变阶段的初期征兆。因此，有学者推测高甲基化的出现与慢性粒细胞的成熟障碍相关联。并认为CT基因高甲基化，可作为检测CML向急变阶段进展的分子基因标志。综上所述，降钙素基因与