人结直肠活组织HIV-1黏膜感染模型的建立.pdfVIP

生堡亟笾医堂盘查垫!!至!旦筮箜鲞筮呈塑垦照i坠』￡型丛鲤：旦笪型!翌!Q!!：!生箜：塑垒至 ·127· ．论著． 人结直肠活组织HIV．1黏膜感染模型的 建立 杨瑜刘爱平孟庆来徐建青张晓燕 【摘要】 目的建立与HIV．1黏膜感染相关的结直肠活组织体外培养模型，利用假病毒模拟 HIV．1进入黏膜建立感染的生物学过程。方法在知情同意下，取肿瘤手术患者癌旁正常结直肠组 织，保留黏膜层与黏膜下层，钻取成统一大小(直径6ram)的组织块置于12孔板中培养。HE染色观 察培养0d至13d时组织形态结构的变化，噻唑蓝法(MTT法)同步检测组织活性。采用单轮复制周 期假病毒感染黏膜并持续培养6-7d，通过检测上清中p24含量验证该模型再现HIV·1黏膜感染的 适用性；以进入临床实验的预防HIV一1黏膜感染的第1代微牛物杀菌剂壬苯醇醚-9(N-9)为例，验证 该模型对黏膜外用药物的反应性。结果HE染色观察至5d时结直肠组织结构良好，13d时黏膜组 织结构依然可见。经M1T法检测黏膜培养4d时活性高于80％，7d的活性可保持在50％左右。假 病毒感染该活组织模璎后半量换液1、4、8 d的培养上清中，检测到p24的含量升高；同时，该组织模 型活性可灵敏地反映出N-9浓度的变化。结论成功建立一种人体结直肠活组织HIV·1体外感染模 型，可模拟人体HIV—l黏膜感染的生物学过程。 【关键词】肠黏膜；模型，生物学；HIV感染；体外研究 ofhmnan modelinIⅡv．1mucosalinfecti佣 Establislnnentcoiorectaltissue 弘鹏沌‘．LIUAi． Research PublicHealth Xiao—yara‘Scientific ping，MENGQing—f斫，XUJian—qing，ZHANG Center，Shanghai C1inicalCenter toFudan Affiliated University．Shanghai201508，China author：ZHANG com．cn Corresponding Xiao—yan，Email：zhang_xycn2002@yahoa ToestablishhumancoloreetaltissuemodelinHIV．1mucosalinfectionand 【Abstract】objective HIV—l virustosimulatethe ofHIV-lmueosalinfectionfrom byusing biologicalprocess entrying pseudotyped into to localinfectionestablishment．nethodsTumor normalcolorectaltissueswere mucosa adjacent obtainedwithinformedconsent．Afterexcisedthemuscularisextema．themucosaandsubmueosawere same l dissectedintothe blocksandculturedin 2．wellcellculture cuhuredtissuestructureand