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发光细菌毒性检测技术在水质检测中的应用

精品论文 参考文献 发光细菌毒性检测技术在水质检测中的应用 张崇华张振峰闫海 (黑龙江省哈尔滨市疾病预防控制中心150056) 【摘要】目的:检测哈尔滨市饮用水的急性综合毒性、遗传毒性和6项理化指标,建立以理化检测为基础,与水质综合毒性评价、遗传毒性相结合的水质评价体系。方法:将水样按检测标准要求进行前处理,采用发光细菌毒性检测试验、Ames试验、理化检测试验评价水质饮用安全性。结果:以上三项试验结果显示样品的检测指标符合饮用水检测标准,可以正常饮用。结论:三种测试法的结论一致,发光细菌毒性检测试验应用在水质污染突发事件的快速应急监测和饮用水日常监测方面能完善水质评价体系,科学准确地评价水质对人群健康的综合影响。 【关键词】饮用水;综合毒性 【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】1671-8725(2014)12-0170-01 随着科技的迅猛发展,环境污染的问题越来越突出,监测水体污染状况,控制水体质量,日益受到人们的关注。单一指标不能科学准确地评价水质对人群健康的综合影响,因此对水体综合毒性的评价,成为水质监控的重要内容。我国于1995年颁布实施了《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB/T 15441 1995),经过科研工作者多年的研究改进,该方法已成为水质急性毒性快速检测的首选方法。发光细菌法利用生理状态下发光的细菌,在水中遇到化学毒物时发光被抑制的特点,通过检测暴露于毒物环境中的发光菌发光受到抑制程度可以判断毒物毒性的大小[1]。该法相对化学分析和传统的鱼、藻、哺乳动物类生物分析法具有快捷、低廉的优势。本研究利用发光菌毒性检测法对H 市饮用水的综合毒性进行检测,同时用理化分析方法、Ames 试验进行检测,三种测试法的结论一致,具有很好的相关性。 1 对象与方法 1.1 对象 分别于2013 年5 月-9月每月一次采集管网饮用水进行急性综合毒性检测和理化分析。Ames试验由于每月一次实验结果差异不大,只于7 月采集一次样品用于对比分析。 1.2 方法 采用《水质急性毒性的测定发光细菌法》(GB/T15441 1995)[2]、《生活饮用水标准检验方法》(GB5479-2006)[3]标准中的方法,对样品的急性综合毒性和6 种相关理化指标PH、砷、汞、氰化物、挥发酚、硝酸盐氮进行检测。Ames 试验按照操作程序[4]采用平皿掺入法试验。菌株采用鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型突变菌株TA98 与TA100,并经四步法鉴定合格,样品浓集物以DMSO 为溶剂,每个水样设4 个剂量,分别为1L/ 皿、3L/皿、5L/皿、7L/皿(即相当于每皿1、3、5L、7L 原水样)。取不同浓度样品0.1ml,新鲜菌液0.1ml,融化顶层2ml,混匀后铺在底层培养基上,37℃孵育48h,计算每皿的回变菌落数。阳性对照选用敌克松(62.5mu;g/ 皿),被测试水样每个剂量组设3 皿平行,实验重复进行2次。最后以6皿均数的MR值表示。若测试菌株的MR 值大于或等于2 并呈现剂量反应关系时判为阳性结果。 2 结果 2.1 水质综合毒性 发光细菌法检测水质急性综合毒性以相对发光率表示。采用中国科学院南京土壤所分级标准进行毒性判定[5]。相对发光率(%)>70%属于低毒,50%--70%为中毒,30%--50%为重毒,5%--30%为高毒,0%--5%为剧毒。 相对发光率=(样品发光强度/对照发光强度)times;100%五次水质急性综合毒性检测的相对发光率分别为95%、93%、88%、98%、90%,均在88%-100%之间,按着判定标准均属于低毒。 2.2 理化检测 理化方法检测的PH、砷、汞、氰化物、挥发酚、硝酸盐氮等6 项指标均符合《生活饮用水标准检验方法》(GB5479-2006)对生活饮用水的要求。 2.3 Ames试验 水样的四个检测剂量两个菌株的致突变率均<2,为阴性结果。表明样品不具有潜在的致突变性,可以安全饮用。 3 讨论 本研究采用发光细菌检测法、理化检测法和Ames 试验对H 市饮用水进行检测,PH、砷、汞、氰化物、挥发酚、硝酸盐氮等6 项均符合《生活饮用水标准》的要求,水质急性综合毒性等级属于低毒,Ames试验两菌株的致突变率小于2,为阴性结果,不具有致突变性。三种方法三种测试法的结论一致,具有很好的相关性。 由于水体中的污染物种类复杂,用单一的理化指标难以表示其污染程度,不能全面反应水体

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