微生物学检验葡萄球菌属.ppt

球 菌 种类: 革兰阳性 葡萄球菌属、链球菌属（链球菌、肺炎链球菌）、肠球菌属、微球菌属等 革兰阴性 奈瑟菌属、布兰汉菌属 葡萄球菌属 最常见的化脓性球菌 医务人员的葡萄球菌带菌率高 革兰阳性、葡萄串状排列 产生不同的脂溶性色素 触酶试验阳性 发酵葡萄糖 金黄色葡萄球菌是主要致病菌 形态染色 革兰阳性球菌、葡萄串状排列 无鞭毛、无芽孢、一般不形成荚膜 葡萄球菌革兰染色镜下图 培养特性 生长条件 需氧、兼性厌氧 营养要求不高，普通培养基上生长良好 耐盐，10～15％NaCl上能生长 培养特性 生长现象 液体培养基：均匀混浊、少许沉淀 固体培养基：中等大小菌落、圆形、凸起、边缘整齐、光滑、湿润的S型菌落 常用培养基及菌落特征 血平板（营养培养基）： 中等大小、光滑型菌落、脂溶性色素色素、透明溶血环（致病葡萄球菌） 高盐甘露醇平板（选择鉴别培养基）： 淡橙黄色菌落（致病葡萄球菌） 卵黄高盐琼脂平板（选择鉴别培养基）： 菌落周围形成白色沉淀圈（致病葡萄球菌） 生化反应 触酶试验：+ 葡萄糖氧化发酵试验：发酵+ 甘露醇分解试验：+（致病菌株） 抗原构造 ★葡萄球菌A蛋白（SPA） 存在于金黄色葡萄球菌细胞壁 可与人和其它哺乳动物IgGFc段非特异性结合，应用于协同凝集试验 抵抗吞噬细胞的吞噬 ★多糖抗原 具有型的特异性,有助于金葡菌感染的诊断 分类和分型 葡萄球菌包括32种及亚种 根据产生色素的不同分类 根据产生凝固酶与否进行分类 按噬菌体分型法分类 金葡菌噬菌体分型 分型：分五个群，共22型 意义：追踪传染源 抵抗力 是抵抗力最强的无芽孢细菌 耐干燥 对龙胆紫敏感 易形成耐药性：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为医院感染最常见的致病菌 致病物质 凝固酶 葡萄球菌溶素 杀白细胞素 肠毒素 剥脱毒素 毒性休克综合征毒素－1 凝固酶 游离凝固酶：采用试管法检测 结合凝固酶：采用玻片法检测 金葡菌凝固酶试验均为阳性 凝固酶试验是鉴定金葡菌的重要标志 所致疾病 侵袭性疾病 化脓性感染：疖、痈、甲沟炎、中耳炎、脑膜炎、败血症等 毒素性疾病： 食物中毒、假膜性肠炎等 免疫性 有一定天然免疫力 病后获得的免疫力作用不强、不持久 微生物学检验 标本采集 根据病种不同，采集不同标本 脓液、创伤分泌液、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便 检验程序 金葡菌脓标本检验程序 检验方法—直接镜检 方法:取标本直接涂片,革兰染色后镜检 初步报告: “查见革兰阳性葡萄串状排列球菌，疑似葡萄球菌” “查见革兰阳性球菌” 检验方法—分离培养 脓、痰、脑脊液标本－→接种血平板 菌落特征：光滑型、中等大小、脂溶性色素、透明溶血环（β-溶血环） 检验方法—分离培养 粪便标本－→高盐甘露醇平板 菌落特征：光滑型、中等大小、淡黄色菌落 检验方法—分离培养 血标本－→增菌（葡萄糖肉汤）－→分离培养（血平板） 生长现象：混浊、胶胨状凝固、溶血 金葡菌的鉴定依据 血平板上金黄色色素、β-溶血环 血浆凝固酶 + 发酵甘露醇 + 耐热核酸酶 + 凝固酶阴性葡萄球菌（CNS） 条件致病菌 医院内感染的重要病原菌 对多种抗生素耐药 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）是院内感染的重要病原菌之一，MRSA、MRCNS对多种抗生素耐药，MRSA不仅对青霉素类、头孢菌素类等β－内酰胺类抗菌药物耐药，同时也对四环素、红霉素、氯霉素、克林霉素及庆大霉素等常用抗菌药物耐药，对利褔平和磺胺的耐药率也达30％，但通常对万古霉素敏感。MRSA、MRCNS常常引起院内感染与播散，且难于治疗和控制，病死率高。 有资料表明两者的耐药谱及机理都有许多相似的地方，其传播方式是患者――医护人员――患者之间的传播，特别是医护人员手的传播，这些带菌者是有可能成为传染源，推测病房医护人员MRSA,MRCNS带菌可能是由于长期工作在病房，接触患者较多所致。 鉴定试验：血浆凝固酶试验 玻片法：检测结合型血浆凝固酶，简便快速 试管法：检测游离型血浆凝固酶，灵敏 协同凝集试验 SPA 链球菌属 分布：自然界、人和动物肠道、健康人鼻咽部 所致疾病：致病链球菌引起各种化脓性炎症、猩红热、风湿热等疾病。 生物学性状 形态染色 培养特点 生化反应 抗原构造 分类 抵抗力 形态染色 革兰阳性球菌，链状排列，无鞭毛，无芽孢，可形成荚膜 在液体培养基中易形成长链 致病性强的菌株多为长链 在脓汁标本中多为短链 链球菌电镜图 链球菌革兰染色 培养特点－－生长条件 营养要求高，在含血液、血清培养基上生长良好 需氧、兼性厌氧 D群链球菌可在10℃、45 ℃生