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精品论文 参考文献 Girdin在胶质瘤中的表达及其与血管生成的关系 （1 滨州医学院烟台校区 山东烟台 264000；2 山东中医药高等专科学校 山东烟台 264000） 摘要:目的：研究胶质瘤中Girdin的表达及其与胶质瘤血管生成的关系，探讨Girdin在胶质瘤血管生成中的作用。方法：应用免疫组化Envision法检测Girdin在正常脑组织和不同级别胶质瘤中的表达情况；同时应用CD34抗体标记胶质瘤血管内皮细胞，计数肿瘤微血管密度（MVD），并分析Girdin与MVD之间的关系。结果：1.Girdin在正常脑组织中不表达，在胶质瘤中表达高于正常脑组织，且随着胶质瘤WHO分级的升高，Girdin表达呈升高趋势，差异均有显著性意义 (P＜0.05）。2.随着胶质瘤WHO分级的升高MVD计数呈上升趋势，高、低级别胶质瘤之间的MVD计数比较，差异有显著性意义(P＜0.05）。3.胶质瘤中Girdin表达与MVD呈正相关（r=0.468，P＜0.01）。结论：胶质瘤中Girdin高表达，且其表达与胶质瘤血管生成之间均存在较好相关性，提示Girdin可促进胶质瘤新生血管的形成，有利于胶质瘤细胞增殖、侵袭及转移，从而促进胶质瘤的发生发展。 关键词：胶质瘤 ；Girdin；VEGF；血管生成；MVD 胶质瘤是最常见的恶性程度极高的中枢神经系统肿瘤，高度血管化，侵袭性强、易复发、难切除，传统的放化疗及手术治疗效果较差。瘤细胞恶性增殖和浸润[1，2]侵袭破坏局部脑组织是造成胶质瘤患者死亡的首要原因。 肿瘤的发生、发展、增殖、侵袭及转移均依赖于肿瘤血管生成[3]。 肿瘤血管生成活跃程度对组织病理分级、放射治疗以及在预后判断上都具有重要的评估价值。 Girdin是一种新发现的肌动蛋白结合蛋白，在肿瘤的起始进展过程中扮演着重要角色[4]，可作为抗肿瘤转移的新靶点。本研究旨在探索与肿瘤血管生成关系密切的Girdin在胶质瘤中的表达情况其与胶质瘤血管生成的关系，以明确Girdin在胶质瘤血管生成中的作用，为胶质瘤的血管生成和治疗提供新的认识。 1资料和方法 1.1 一般资料 选择烟台毓璜顶医院2013年8月至2015年11月经手术病理证实的胶质瘤患者52例，作为实验组。所有患者均首次发病，术前未行任何治疗。病理分级按照2000年WHO颅脑肿瘤的分类标准，进行病理组织学评估：I～II级16例，III～IV级36例。为方便统计分析，将WHO I～II级归为低级别胶质瘤组，WHO III～IV级归为高级别胶质瘤组。另选择同期在该院因脑外伤行颅内减压术并经病理证实为正常脑组织的标本20例，作为对照组。 1.2 主要试剂 兔抗人Girdin多克隆抗体，鼠抗人CD34单克隆抗体。 1.3 方法 1.3.1 标本处理 术中取新鲜标本，10%甲醛固定，常规石蜡包埋。每例组织连续切片4mu;mtimes;3片，一片行HE染色以明确病理诊断，其余两张行免疫组化染色。 1.3.2 免疫组化（Envision二步法）染色 实验步骤严格按照操作方法说明进行，Girdin多克隆抗体浓度1：120，CD34单克隆抗体浓度1：60。阴性对照采用PBS代替一抗，阳性对照采用结肠癌组织。 1.3.3 免疫组化结果判定 1.3.3.1 Girdin判定标准 Girdin阳性结果为细胞浆内出现棕黄色颗粒。每张切片随机观察10个高倍镜视野，计数100个胶质瘤细胞中阳性细胞数目，根据胞浆染色强度和阳性细胞百分比评定。胞浆染色强度：无染色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，深棕色计3分。阳性细胞百分比：无染色细胞为0分，染色细胞le;25%为1分，染色细胞26%～50%为2分，染色细胞gt;50%为3分。上述两项相乘，按乘积分4级：0分为阴性（－），1～2分为弱阳性（＋），3～5分为中等阳性（＋＋），ge;6分为强阳性（＋＋＋）。 1.3.3.2 MVD计数 CD34标记肿瘤组织血管内皮细胞。以清晰棕黄色单个或数个血管内皮细胞围绕成簇作为1个血管标记。低倍镜选择MVD热区，转高倍镜下计数，取5个视野MVD平均值作为MVD。 1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件。计量数据用均数plusmn;标准差表示。各参数值之间比较用x2检验及相关系数检验，相关性采用Spearman等级相关检验，以P ＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 Girdin在正常脑