氧载体正十六烷对红法夫酵母发酵产虾青素的影响.docxVIP

氧载体正十六烷对红法夫酵母发酵产虾青素的影响王小连 1 , 魏维 2 , 3 , 李秋爽 2 , 徐威 1( 11沈阳药科大学 生命科学与生物制药学院 ,辽宁 沈阳 110016; 21上海来益生物药物研究开发中心 ,上海 200240;31上海医药工业研究院 ,上海 200240 )摘要 : 目的 考察氧载体正十六烷对红法夫酵母发酵产虾青素的影响 。方法 采用单因素实验法在不同生长时期添加不同浓度正十六烷 。结果 在对数生长期添加体积分数 6 %的正十六烷 ,可使生 物量提高 20114% ,单位细胞虾青素产量从 0169 m g·g- 1增加到 0194 m g·g- 1 ,说明氧载体的存在使 产物合成能力提高了 35190% 。结论 添加氧载体正十六烷可以加强发酵液中氧传递 ,提高溶氧水 平 ,促进虾青素的单位合成效率 。关键词 : 红法夫酵母 ; 虾青素 ; 氧载体 ; 正十六烷中图分类号 : Q 815文献标志码 : A虾青素 ( a staxan th in ) 化学名称 3 , 3 ′2二羟基 24 , 4 ′2二酮基 2β, β′2胡萝卜素 , 又称虾黄质、虾黄 素 ,是一种非维生素 A 源类胡萝卜素 。虾青素广泛分布于自然界尤其是海洋环境中 ,其具有抑制 多不饱和脂肪酸的氧化 、改善视力、抗癌 、提高免疫力、促进色素形成等重要的生物学功能 [ 1 - 3 ] ,在 医药、保健品、化妆品及饲料等行业有着广阔的应 用前景 。红法夫酵母 ( X an thophy llom yces dend ro2rhous)是一种产虾青素的酵母 , 在其所产的类胡萝卜素中虾青素是主要成分 ,因而被认为是最有 可能实现工业化发酵生产天然虾青素的优良菌种 [ 4 ] 。人们采用了多种方法提高红法夫酵母发 酵产虾青素的产量水平 ,如选育高产虾青素的突变株 ,优化发酵培养基组成 ,添加发酵促进剂和氧载体 [ 5 - 7 ]等 。作者对多种有机溶剂在红法夫酵母 培养过程中作为氧载体的效果进行了评价和筛选 ,并具体考察了正十六烷添加浓度和添加时间 对细胞生长及虾青素合成的影响 ,经条件优化后虾青素的产量得到了明显地提高 。len t1100 液相色谱仪 (包括 A gilen t1100 系列二元泵 、DAD 检测器 、自动进样器 、A gilen t Chem 2 sta tion色谱工作站 , 美国 A gilen t公司 ) , A gilen t 液质联用色谱仪 (包括 6110 单四极杆质谱仪 、 大气压电离 2电喷雾电离源 ( A P I2ES) 、大气压化 学电 离 源 ( A PC I) 、A gilen t21100 系 列 四 元 泵 、VWD 检测器 、A gilen t Chem sta tion 色谱工 作站 ,美国 A gilen t公司 ) 。虾青素标准样品 (美国 Sigm a 公司 ) ,酵母抽 提物 、胰蛋白胨 (英国 O xo id 公司 ) , 麦芽抽提物 (上海源 聚 生 物 科 技 有 限 公 司 ) , 二 甲 基 亚 砜 (DM SO ) 、甲醇和氯仿 (分析纯 ) 、葡萄糖等 (国药集团化学试剂有限公司 ) 。112 菌种菌 种 为 X an thophy llom yces dend rorhous HC2CB 30025由上海来益生物药物研究开发中心保 存 。113 培养基YM 培养基 ( g·L - 1 ) : 葡萄糖 1010、酵母抽提 物 310、胰蛋白胨 510、麦芽抽提物 310。发酵 培 养 基 ( g·L - 1 ) : 葡 萄 糖 5010、蔗 糖5010、酵 母 浸 粉 410、( NH4 ) 2 SO4 410、KH2 PO4110、CaCO3 115 , pH 610。2 方法1 仪器与材料111 仪器与试剂pH s22C数显型酸度计 (上海宇隆仪器有限公 司 ) , H Z22410 KB 恒温摇床 (太仓科教器材厂 ) ,高压蒸 汽 灭 菌 锅 (日 本 H IRA YAM 公 司 ) , A gi2收稿日期 : 2010203215作者简介 :王小连 ( 19832) ,女 (汉族 ) ,河北石家庄人 ,硕士研究生 , E2m a il w ang tongx i2002 @ 163. com ; 徐威 ( 19632) ,女 (汉族 ) , 吉林长春人 , 教授 , 主要从事微生物制药及基因工程药物研究 , Te l. 024223986400, E2m a il shxuw e i8720 @163. com 。沈 阳 药科大 学 学 报第 28卷74211 种子培养将在 YM 斜面已活化 96 h的菌种接种