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第九章 多种动物共患疫病生物制品

诊断制剂: 间接血凝试验和免疫扩散沉淀试验 核酸杂交、探针、寡核苷酸指纹图、等电聚焦、PCR和核酸序列分析等 狂犬病(Rabies) 狂犬病病毒 病毒糖蛋白构成病毒脂质包膜上突起的部分,能诱发病毒的中和抗体,免疫动物后,对狂犬病有防御作用 固定毒与街毒株之间抗原组成不同,可能是造成使用疫苗时保护不全的原因 狂犬病病毒分为4个血清型 不同地区分离的狂犬病病毒之间存在着抗原差异,但这种差异对免疫保护力的影响不明显。 疫苗:改良型的Semple氏疫苗、犬用狂犬病活疫苗 改良型的Semple氏疫苗 种毒:巴黎株狂犬固定毒通过兔脑传代作为种毒。脑内活硬脑膜下接种成年健壮的绵羊,一般接种后3天体温上升,第4~7天呈现四肢麻痹、瘫痪等明显症状,待体温下降濒死时,剖杀取脑组织 制造要点:无菌检验、毒价测定-用含60%甘油及1%苯酚的蒸馏水按1:4制备脑组织乳剂-过滤后36℃脱毒7h-稀释后脑内接种小鼠,检查脱毒是否安全 质量标准 效价测定:小鼠,保护指数不低于10000LD50 免疫次数、时间、剂量 攻毒时间、剂量 免疫组 (40~50只) 6次,每次间隔1天,腹腔注射0.3ml 40倍稀释的疫苗 第1次免疫后14天攻毒,10-1~10-5稀释度的病毒液,分别脑内接种0.03ml 对照组 (30~40只) - 10-3~10-7稀释度的病毒液,分别脑内接种0.03ml 各种动物可用,后腿或臀部肌肉注射。 犬用狂犬病活疫苗 种毒:Flury株狂犬病鸡胚低代毒(LEP) 制造要点:BHK21细胞上增殖培养,冻融后收集培养物,检查无菌和毒价,按1:1加入5%蔗糖脱脂牛奶,混合,分装冻干 质量标准: 效价测定:对小鼠LD50不低于104.0/0.03ml 疫苗特异性检查:疫苗稀释液与抗狂犬病阳性血清混合,37℃1h,脑内注射小鼠,10d均应健活 使用:加入磷酸盐缓冲液稀释后,肌肉注射,免疫期至少1年 基因工程疫苗:牛痘病毒狂犬病病毒糖蛋白基因重组体疫苗(V-R Gleu 8和v-R Gpro 8) 治疗制剂: 抗狂犬病血清: 绵羊或山羊,用灭活狂犬病疫苗基础免疫,再用巴黎株狂犬病固定毒加强免疫,中和抗体达1:32以上时,采血,冻干 流行性乙型脑炎(Epidemic encephalitis B) 流行性乙型脑炎病毒易在7~9日龄的鸡胚内适应和增殖,接种48h病毒效价达最高峰,胚体含毒量最高 病毒可在多种继代和传代细胞内增殖,可在琼脂覆盖下的鸡胚成纤维细胞单层内产生清晰的蚀斑 可在蚊子的组织培养细胞内复制 乙脑病毒可产生坚强持久的免疫力,并且乙脑病毒抗原变异不明显,为乙脑疫苗用于预防提供了联合基础 流行性乙型脑炎灭活疫苗:鼠脑灭活苗、鸡胚灭活苗和仓鼠肾细胞灭活苗 种毒:猪乙型脑炎病毒HW1株 方法:病毒脑内接种小鼠,3~4天后小鼠出现症状或濒死小鼠,取脑组织制成10%悬液,离心,取上清,加入0.2%甲醛4℃灭活21d,加入油佐剂乳化即成。 流行性乙型脑炎活疫苗 2-8减毒株:对2~3日龄乳鼠有较低致病力,脑内接种死亡率70%,皮下接种死亡率50%。脑内接种3周龄小鼠,基本不引起死亡,脑内传代毒力稳定。用仓鼠肾细胞培育病毒。用于孕马,未发现胎儿畸形 14-2减毒株:毒力弱免疫原性好,接种仓鼠肾细胞,用于人、马、猪。通过猪体繁殖5代,未见毒力回升。可用仓鼠肾细胞和BHK21培养。 5-3减毒株:在仓鼠肾细胞内增殖,在琼脂覆盖下的鸡胚成纤维细胞单层内产生清晰的蚀斑;脑内接种3周龄小鼠和恒河猴,不引起死亡,对乳鼠有一定致病力;皮下注射3周龄小鼠,病毒不侵入脑组织,在小鼠脑内连续传代3~5代,其残余毒力未见回升。可用于儿童接种,保护率80~90%,抗体阳转率85~91%。用于孕马,个别出现先天畸形。 诊断:乳胶凝聚试验试剂盒 流行性感冒(Influenza) 流感病毒含有核糖核蛋白(RNP)、血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)3种特异性抗原 流感病毒抗原性变异频率较高,主要以漂移和转变进行 抗原漂移可引起HA和NA的次要抗原变化,抗原转变则可引起HA和NA的主要抗原变化 细胞感染两种不同的流感病毒时,病毒基因组的片段也可发生遗传重组 来自不同宿主的病毒也易发生基因交换 禽流感(Avian influenza) 16种HA和9种NA,其中H5和H7为高致病力毒株 禽类对16个HA亚型流感病毒易感,感染后7~10d便可产生抗体 当流感暴发时,只要确认病毒亚型,再免疫接种相应亚型的灭活苗可以缓解临床症状和死亡 免疫后的鸡不能阻止病毒感染,但可减少排毒,降低病毒传播的可能性 在弱毒力禽流感暴发时,应慎重用疫苗,以延缓和降低高致病力病毒发生的机会 疫苗:灭活单价苗和多价疫苗 HA基因工程疫苗、

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