免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油中黄曲霉毒素B1.pdfVIP

※分析检测 艮晶科学 2013，VoL34,No．18 165 免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测 酱油中黄曲霉毒素B1 谢 芳 ，赖卫华 术，史爱武 ，邓省亮 ，熊勇华 ，余扬帆 (1．南昌大学 食品科学与技术国家重点实验室，江西 南昌 330047；2．无锡中德伯尔生物技术有限公司，江苏 无锡 214000； 3．江西省科学院微生物研究所，江西 南昌 330029) 摘 要：将活泼酯法活化后的羧基化超顺磁珠与辛酸一硫酸铵法纯化的抗黄曲霉毒素B单克隆抗体偶联，获得黄曲 霉毒素B(AFB，)免疫磁珠。比较不同粒径大小的免疫磁珠的富集效率，优化磁珠偶联抗体的条件以及富集AFB。的 反应条件，初步建立了以免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油基质中的AFB的方法。结果表明：酶联免疫 吸附法在0．05～0．31agk／g范围内具有 良好的线性关系，相关系数为0．9842。在酱油中添加1~71agk／gAFB的平均加标 回收率为83．6％～104％，相对标准偏差为7．2％～13．7％。该方法具有快速简便、设备简单、灵敏度高、准确性好等 优点，可很好地应用于酱油中的AFB的快速检测。 关键词：免疫磁珠；酱油；黄曲霉毒素B；酶联免疫吸附法 ImmunomagneticBeadEnrichmentandELISA forDetectionofAflatoxinB1inSauce XIEFang，LAIWei—hua。一，SHIAi—WH ，DENG Sheng—liang，XIONG Yong—hua，YU Yang—fan (1．StateKeyLaboratoryofFoodSciencenadTechnology，NnachnagUniversity，Nnachang 330047，China； 2．WuxiZodolabsBiologicalTechnologyCo．Ltd．，W uxi 214000，China； 3．InstituteofMicrobiology，JiangxiAcademyofSciences，Nanchang 330029，China) Abstract：Superparamagneticparticleswithcarboxylgroupactivatedbytheactiveestermehtod，coupledwiht anti—aflatoxinBl monoclonalna tibodypurifiedbyhtecaprylicacid-ammonium sulfatemehtodtoform immunomagneticbeads．Theenrichment efficiencyofimmunomagneticbeadsofdifferentsizes，andtheconditionsfornatibodycouplingandaflatoxinB1enrichmentwere studied．Amehtod wasestablishedtodetectaflaotxinBlnisaucebyusinganimmunomagnelicbeadsystemforaflaotxinBlenricmh ent andallELISA method ofrqunatification．Th eimmunomagneticbeadsystem wascomparedwiththeex~acfionmethod from hte nation~ standardGB／T5009．22-- 2003．Th eELISA mehtod showedagood linera relationshipni hteaflatoxinB1concen~ation of0．05to0-3lagk／gf =0．9842)．Averagerecoveryratesatspikedlevelsof1-7lagk／gwere83．6％-104％wihtrelativestandard deviationof7．2％-13．