免疫组化染色阳性对照的设立、制作与应用.pdfVIP

第 22卷第 5期 中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志 Vo1．22．No．5 2013年 1O月 CHINESE J0URNAL 0FHIST0CHEM ISTRY AND Y October．2Ol3 免疫组化染色阳性对照的设立、制作与应用 刘 妮 李淑华 梁英杰 杨诗聪 (中山大学附属第一人 民医院病理科 广州 510080) [摘要] 目的 探讨如何设立免疫组化染色的阳性对照，使操作更简单、结果可靠和方法实用 。方法 选取阑尾、乳腺 和扁桃体等不同类型的组织，通过 HE切片观察，选取合适相应抗原表达的区域，将组织切成 0．3cm*0．3cm大小，重新作石 蜡包埋 ，连续切片厚 4m，贴在待检查组织旁边作为对照，进行 CK、CK19、SMA、CD20、CD3、ER、PR、等 36种抗体 的免疫组化 染色，并观察组织中抗原的表达是否正确，筛选出适合作为免疫组化染色阳性对照的组织。结果 乳腺皮肤和扁桃体组织仅 部分抗体染色阳性，而阑尾组织中有多种抗原表达 ，34种抗体染色均呈阳性 ，染色阳性的其他相对 区域 的组织细胞呈阴性染 色。结论 阑尾组织可作为大多抗体染色的阳性对照和阴性对照。方法简单，操作方便 ，节省抗体，适用于临床批量工作，对 免疫组化的染色过程起到很好的质控作用。但对于某些抗体染色，如ER、PR等抗体的阳性对照，则应选用相应的组织如含 正常导管上皮乳腺导管癌组织作对照。 (关键词] 免疫组化 ； 阳性对 照 ； 质量控制 [中图分类号] Q954．63 [文献标识码] A 免疫组化技术在病理诊断中起着十分重要的作 经来源的抗体有 Vimentin、S—100、NSE、CD56，标记 用，但前提是要有稳定和高质量 的免疫染色结果 血管及淋 巴管 内皮 的抗体有 CD31、CD34、D2—4O、 口]。 然而免疫组化 的染色过程 比较复杂 ，影响染色 FactorⅧ，淋 巴瘤相关抗体有 LCA、CD20、CD79a、 结果的因素也很多 _2]，所以设置免疫组化对照尤为 CD3、CD5、CD1O、CD21、CD23、CD4、CD8，乳腺癌标 重要 。本实验研究在多种不同类型的组织中找出合 记相关抗体有 ER、PR、Ki67，组织细胞来源相关抗 适 的免疫组化 阳性对照及其相关制作方法 。 体有 CD68，Mac387，AAT，AACT，Lyosozyme。 材料和方法 结 果 1．材料 A组：阑尾组织 中CK、CK8／18、CK19、CK2O、 选取 中山大学附属第一 医院送检 的阑尾、乳腺 CK-LMW、M-CEA、EMA在腺上皮胞浆呈 阳性 (图 和扁桃体组织 ，1O％中性甲醛固定 ，常规脱水石蜡包 1)；SMA、HHF35、Calponin显示为肌层肌纤维胞浆 埋 ，切片厚 4ffm。 阳性 (图2)；Vimentin显示为 间叶组织胞浆 阳性； 2．方法 100、NSE、CD56为肌层神经纤维阳性 (图 3)；CD31、 选取 的组织通过 HE染色观察 ，根据合适相应 CD34粘膜下层血管内皮阳性 ；D2—40、FactorⅧ为淋巴 抗原表达的区域 ，将各组织切成 0．3cm ×0．3cm 大 管内皮 阳性；LCA、CD20、CD79a、CDIO淋 巴细胞 阳 小进行再包埋 ，保证各组织包埋面含有相应 的组织 性，CD21、CD23在固有层 的淋巴小结滤泡生发中心 成分 ，如阑尾组织应含有粘膜层 ，粘膜下层 ，肌层和 的树突状细胞胞膜呈 阳性 ；CD3、CD4、CD5、CD8则在 外膜等结构 。将 阑尾 、乳腺和扁桃体组织分成 A、 滤泡周 围的淋 巴细胞呈 阳性表达