人参皂苷Rg1对衰老模型大鼠骨髓造血功能的影响及其机理-生物通.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１５，３５（８）：１６２２ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 人参皂苷Ｒｇ１对衰老模型大鼠骨髓 造血功能的影响及其机理 邵　月　张力恒　冉瑞图　孙嘉政　张　晶　张梦思　贾道勇　张岩岩　王亚平２ （重庆医科大学干细胞与组织工程研究室　重庆　４０００１６） 摘要　目的：探讨人参皂苷Ｒｇ１对衰老模型大鼠骨髓造血功能的影响及其机理。方法：ＳＤ大鼠 随机分为４组，每组１０只。衰老模型组，皮下注射Ｄ半乳糖 １２０ｍｇ／ｋｇｑｄ×４２；Ｒｇ１衰老模型组， 注射Ｄ半乳糖剂量与时间同衰老模型组，第１５ｄ起腹腔注射Ｒｇ１２０ｍｇ／ｋｇｑｄ×２８；正常对照组， 皮下注射生理盐水ｑｄ×４２；Ｒｇ１正常对照组，注射生理盐水ｑｄ×１４，第１５ｄ起腹腔注射 Ｒｇ１（同 Ｒｇ１衰老模型组）。模型复制或药物注射完成后第２ｄ，采外周血检测血白细胞总数与分类计数和 晚期糖基化终产物（ＡＧＥｓ），骨髓单个核细胞（ＢＭＮＣｓ）计数，衰老相关 半乳糖苷酶（ＳＡＧａｌ） β β 染色检测ＢＭＮＣｓ衰老百分率，多向造血祖细胞集落（ＣＦＵＭｉｘ）培养检测ＢＭＭＣｓ形成集落能力； Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＢＭＭＣｓ衰老相关蛋白Ｐ２１和Ｐ５３的变化；提取腹腔巨噬细胞进行培养，比色 法检测巨噬细胞吞噬功能。结果：与衰老模型组比较，Ｒｇ１衰老模型组外周血白细胞数量增多， ＋ ＋ 淋巴细胞比例升高，粒细胞比例降低，ＣＤ８Ｔ细胞所占比例降低，ＣＤ４Ｔ细胞所占比例升高，外 周血ＡＧＥｓ水平降低，每根股骨的ＢＭＭＣｓ细胞数增多，ＳＡＧａｌ染色阳性的ＢＭＭＣｓ明显降低， β ＢＭＭＣｓ形成ＣＦＵＭｉｘ能力提高，Ｐ２１和Ｐ５３的表达下调，腹腔巨噬细胞吞噬中性红指数上升。结 论：Ｄ半乳糖复制的衰老模型大鼠骨髓造血功能损伤明显，人参皂苷Ｒｇ１对其致衰损伤有明确的 保护作用，可能机理与调控ｐ５３／ｐ２１信号通路有关。 关键词　人参皂苷Ｒｇ１　衰老模型　骨髓　造血细胞　机理 中图分类号　Ｒ３２９．２ 　　骨髓造血功能衰退将导致机体血细胞生成障碍、 机理进行研究。本文复制Ｄ半乳糖大鼠衰老模型，探 免疫功能低下、肿瘤发生率增加、重要脏器结构与功能 讨人参皂苷Ｒｇ１对衰老模型大鼠骨髓造血功能的影响 衰退，最终加快机体衰老和促进多种老年性疾病发 及其机理，旨在为寻找延缓骨髓造血功能衰退的天然 生［１］。迄今，骨髓功能衰退机理仍不明确，临床上尚无 药物提供理论和实验依据。 有效的防治手段。人参是中医临床“补气”要药，人参 １　材料与方法 皂苷 Ｒｇ１（ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｇ１）是人参的重要抗衰老成 ［２］ 分 。本课题组必威体育精装版研究表明，造血干细胞是所有髓 １．１　实验动物 系和淋巴系细胞的始祖细胞，人参皂苷 Ｒｇ１能延缓造 　　３月龄清洁级雄性ＳＤ大鼠４０只，体重１８０～２００ｇ， ［３］ 血干／祖细胞衰老 。由此推测，人参皂苷Ｒｇ１可以用 由重庆医科大学实验动物中心提供［合格证号 ＳＣＸＫ 于临床防治骨髓功能衰退，但这需要对其作用和相关 （渝２００７０００１）］。饲养条件控制在２０℃～２５℃，自然 照明，自由饮水和摄食。 收稿日期：２０１５０３２８　　修回日期：２０１５０４２０