利用SMART技术构建烟草茎全长cDNA文库.pdfVIP

利用SMART技术构建烟草茎全长cDNA文库.pdf

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福建农林大学学报(自然科学版) 第41卷第1期 of and Journal Science FujianAgricultureForestryUniversity(NaturalEdition) 2012年1月 蔡铁城1,曾建斌1,陈顺辉2,陈华1,贺小彦1,张冲1,庄伟建1 (1.福建农林大学福建省作物分子与细胞生物学重点实验室,福建福州350002; 2.福建省烟草专卖局烟草农业科学研究所,福建福州350003) of mechanismat5’endRNA 摘要:以烟草不同生长时期茎混合为材料,采用SMART(switching eDNA文库.原始文库的库容为5.64×106个独立克隆,重组率达99%以上,插入片段集中在0.75—2.0l【b之间,平均长度 约为1.2l【b.随机挑取部分克隆进行测序,并进行生物信息学分析,37.5%的序列烟草已有报道,62.5%为烟草未报道的基 因,45.8%是未知功能的基因,表明所构建文库达到了用于目的基因分离筛选和新基因克隆的建库要求. 关键词:烟草;茎;SMART技术;eDNA文库 中图分类号:Q78 文献标识码:A 文章编号:1671-5470(2012)01-0053-05 Constructionoftobaccostem cDNA withSⅣ队RT full-lengthlibrary technique CAI Jian—binl,CHENShun.hui2,CHENHual, Tie.ehen91,ZENG HE Xiao.yahl,ZHANGChon91,ZHUANGWei-jianl Labof MolecularandCell and Forestry (1.FujianKey Crop Biology,FujianAgriculture University, of Tobacco and Fuzhou,Fujian350002,China;2.InstituteFujian AgricultureScience, BureauofTobacco 350003,China) Fujian Monopoly,Fuzhou,Fujian mixtureoftobaccostemsofdifferentforthe modified mechanismat5end material,and Abstract:Using periods SMART(switching ofRNA astem eDNA was constructed transcript)technology,wefull—lengthlibrary.Theprimarylibrarycapacity5.64×10。,the recombinationratewasmorethan99%.Theins

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