液体培养基的制备设备.pptVIP

2.2 培养基的灭菌设备 　　3、薄板换热器连续灭菌流程 图2-20为薄板换热器连续灭菌流程。培养液在设备中同时完成预热、加热灭菌、维持及冷却过程。利用薄板换热器进行连续灭菌时，加热和冷却培养液所需的时间比使用喷射式连续灭菌稍长，但灭菌周期则较间歇灭菌短得多。由于待灭菌培养液的预热过程同时为灭菌培养液的冷却的过程，所以节约了加热蒸汽及冷却水的消耗。 2.2 培养基的灭菌设备 图2-20 薄板换热器连续灭菌流程 返回 2.3 种子制备设备 种子制备的工艺流程如图2-21所示: 　　① 实验室种子制备阶段，包括琼脂斜面、固体培养基扩大培养或摇瓶液体培养。 　　② 生产车间种子制备阶段。如种子罐扩大培养。 一般实验室接种多在无菌洁净室内进行，对无菌操作间内的空气及室内用品的无菌程度要求较高。另外，建筑上要求光滑，室内密封性好，干燥。最好有无菌空气导入设施或有调温、通风装置。通常用紫外线杀菌，一般30W紫外线灯开启1h即可满足一般的无菌要求。有时也用乳酸或甲醛等化学消毒剂熏蒸灭菌，。 2.3 种子制备设备 图2-21 种子扩大培养流程图 2.3 种子制备设备 一般在洁净室内常备有超净工作台。其原理主要是借助鼓风机将空气输入，通过粗滤、超滤纤维细滤，使进入净化工作台小室内的空气成为除去微生物、尘埃的无菌而洁净的空气。使用该种设备的房间要求保持洁净无尘，以免因过滤介质吸附饱和而造成短路失效，或者由于阻力太大，风压小而保持不了小室正压，造成外部有菌空气入侵。 2.3 种子制备设备 2.3.1 洁净室 洁净室亦称为无尘室或清净室。是指将一定空间范围内空气中的微粒子、有害空气、细菌等污染物排除，并将室内温度、洁净度、室内压力、气流速度与气流分布、噪音振动及照明、静电控制在某一需求范围内，而给予特别设计的房间。亦即是不论外在空气条件如何变化，其室内均能维持原先所设定要求的洁净度、温湿度及压力等性能特性。 2.3 种子制备设备 　　1．洁净室分类 根据洁净室内空气的运动状态不同,可以将洁净室分为:乱流式、层流式和复合式. 　　（1）乱流式：空气由空调箱经风管与洁净室内空气过滤器进入洁净室，并由洁净室两侧隔间墙板或高架地板回风。气流非直线型运动而呈不规则之乱流或涡流状态。优点：构造简单、系统建造成本低，洁净室扩充比较容易，在某些特殊用途场所，可并用无尘工作台。缺点：乱流造成的微尘粒子于室内空间飘浮不易排出，易污染产品。 2.3 种子制备设备 　　（2）层流式：层流式空气气流运动成一均匀直线形，空气由覆盖率达100%的过滤器进入室内，并由高架地板或两侧隔墙板回风，此型式适用于洁净室等级需求较高的环境使用。① 水平层流式：水平式空气自过滤器单方向吹出，由对边墙壁回风系统回风，尘埃随风向排出室外，一般在下流侧污染较严重。② 垂直层流式：房间天花板完全以过滤器覆盖，空气由上往下吹，可得较高洁净度，在操作中工作人员所产生的尘埃可快速排出室外而不会影响其它工作区域。 2.3 种子制备设备 　　（3）复合式：复合式是将乱流式及层流式予以复合或并用，可提供局部超洁净空气。 　　2．洁净室的构成 洁净室的构成是由下列各项系统所组成：① 天花板系统：包括吊杆、钢梁、天花板格子梁。② 空调系统：包括空气舱、过滤器系统、风车等。③ 隔墙板：包括窗户、门。④ 地板：包括高架地板或防静电地板。⑤ 照明器具：包括日光灯、黄色灯管等。 2.3 种子制备设备 2.3.2 净化工作台 净化工作台由鼓风机驱动空气通过高效过滤器得以净化，使工作区构成无菌环境。根据气流在超净工作台的流动方向不同，可分为侧流式、直流式和外流式三种类型。 超净台在使用时平均风速保持在0.32-0.48m/s为宜，过大、过小均不利于保持净化度。使用前最好开启超净台内紫外灯照射10－30min，然后让超净台预工作10－15min，以除去臭氧和使用工作台面空间呈净化状态。使用完毕后，要用70%酒精将台面和台内四周擦拭干净，以保证超净台无菌。 2.3 种子制备设备 2.3.3 摇瓶机 　　1．摇瓶 在实验室规模的研究中，摇瓶如图2-22所示被广泛而大量地使用。通过摇瓶实验可广泛地改变培养条件和节省反复多次试验所需要的时间，同时，为进一步的放大研究提供大量基础数据。 2.3 种子制备设备 图2-22 一些发酵实验室使用的摇瓶的形状及类型 2.3 种子制备设备