δ-连环素在糖尿病大鼠海马神经元中表达.docVIP

δ-连环素在糖尿病大鼠海马神经元中表达 　【摘要】 目的 观察δ-连环素在大鼠糖尿病模型海马神经元中的表达特征。方法 根据实验需要将大鼠随机分成糖尿病组、正常对照组和缓冲剂组。按45 mg/ kg一次性尾静脉注射链脲佐菌素(溶于0.1 mol/L柠檬酸盐缓冲液)诱发糖尿病,缓冲剂组只给予等量的缓冲液。应用免疫组织化学方法观察海马神经元的形态结构变化，并应用计算机图像分析技术检测δ-连环素在各组中的定量表达。结果 糖尿病组大鼠海马神经元中δ-连环素表达明显低于正常对照组和缓冲剂组，在海马齿状回减少尤为明显。结论 糖尿病可下调大鼠海马神经元中δ-连环素的表达。 【关键词】 δ-连环素;糖尿病;海马;大鼠;免疫组织化学 　　Abstact：Objective To investigate the characteristics of the expression of δ-catenin in diabetic rat hippocampal neurons. Methods The rats were randomized into diabetic, normal control and buffer groups. The rats in the diabetic group were injected with a single dose of 45 mg·kg of STZ (dissolved in 0.1 mol/L sodium citrate buffer) via the caudal vein to induce diabetes mellitus, and the animals in the buffer group received the same dose of sodium citrate buffer alone. The morphological changes of the hippocampal neurons were observed by immunohistochemical method and the quantitative expression of δ-catenin in each group was determined by computer-assisted image analysis system. Result Immunohistochemical method and quantitative assay revealed that the expression of δ-catenin in the diabetic group was the lowest in the three groups, particularly in the dentate gyrus (DG). Conclusion The diabetic functional disorders of the central nervous system may downregulate the expression of δ-catenin. 　　Key words：δ-catenin; diabetes; hippocampus; rat; immunohistochemistry 　　糖尿病神经病变是糖尿病常见的慢性并发症之一，可引起认知功能障碍及大脑的神经生理和结构改变[1-2]。海马是与脑高级功能相关的重要结构，在糖尿病患者中易受到损害，表现为更易发生中风、痴呆和认知减退[3]。 　　δ-连环素属于P120-catenin蛋白家族，特异性地表达在神经元[4]。研究发现δ-连环素过表达能诱导细胞形成树突状突起，并增加原代海马细胞中树突的形成[5]。已有报道δ-连环素基因变异小鼠表现出严重的学习障碍、突触可塑性降低和突触成分的改变。糖尿病患者认知功能减退的机制至今不明，在糖尿病动物海马神经元中δ-连环素的表达变化也鲜有报道。 　　1 材料和方法 　　1.1 动物分组及模型制备 SD雄性大鼠，体重 260～300 g，徐州医学院实验动物中心提供。随机分成正常对照组、缓冲剂组和糖尿病组(n=9)。按文献[6]方法，一次性尾静脉注射链脲佐菌素45 mg/kg(溶于0.1 mol/L柠檬酸盐缓冲液),缓冲剂组只给予等量的缓冲液。3天后测血糖，血糖gt;16.7 mmol/L,饮水及尿量明显增多为造模成功。造模成功后常规饲养60天，中间不进行胰岛素干预，也不进行糖尿病饮食控制，造模后每周监测血糖。每组取9只大鼠5%茂巴比妥钠腹腔注射麻醉，经心脏先灌注100 ml的生理盐水后灌注4%多聚甲醛〔0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)，pH7.3配制〕固定30 min。动物静置于4℃冰箱