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兜唇石斛多糖提取及脱蛋白工艺探究 　 作者：赵俊凌，马洁，李戈，段立胜 【摘要】 目的研究兜唇石斛多糖提取及脱蛋白的制备工艺。方法采用正交实验设计制备不同提取条件多糖溶液，苯酚-硫酸法测定溶液中多糖含量，光密度差值法测定蛋白含量。结果兜唇石斛多糖提取的最佳条件，提取温度100℃，提取时间2 h，加水量200 ml，醇析浓度为80%，醇析时间30 h，多糖脱蛋白的最佳条件，样品/萃取剂(V/V)为4∶1，氯仿/正丁醇(V/V)为4∶1，萃取时间30 min。结论不同提取及萃取条件下，兜唇石斛多糖提取及脱蛋白测定结果存在明显差异。 【关键词】 兜唇石斛; 多糖; 提取; 脱蛋白; 正交设计 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the optimum conditions of extraction and deproteinization from polysaccharide of Dendrobium devonianum. 　　MethodsThe different concentrations of polysaccharide extraction were acquired with the orthogonal experimental design,and the phenolsulfuric acid method and UV spectrophotometric method were used to determine the content and deproteinization of polysaccharide. 　　ResultsThe optimum conditions of polysaccharide extraction from Dendrobium were established as follows:extracting temperature of 100℃,extracting time 2 hours,volume of adding water 200ml,precipitation concentration of ethanol 80%,precipitation time of ethanol 30 hours,that of deproteinization were established as follows:Chloroform-n-butanol 4:1,Chloroform:n-butanol 4:1,stirring time 30 minutes. 　　ConclusionUnder the different condition of extraction and deproteinization,there has significant differences on the determination results for the content of polysaccharide and protein in Dendrobium devonianum. 　　Key words：Dendrobium devonianum; Polysaccharide; Extraction; Deproteinization; Orthogonal design 　　石斛属Dendrobium是兰科中的第二大属，全球共有约一千五百多种，主要分布于亚洲的热带和太平洋岛屿的东亚、东南亚及澳大利亚等地区，我国有76种(74个种，2个变种) 主要分布于华南及西南地区。石斛作为一种名贵中药被《本草纲目》收录，在《神农本草经》中也被列为上品，其有养胃生津、滋阴清热、明目的功能,用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕,病后虚热,目暗不明等症状。现代药理研究发现石斛属植物具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、抗血小板聚集、扩张血管、降低血糖等多种活性[1]，同时在治疗胃肠道疾病和治疗白内障方面也有很好疗效。 　　兜唇石斛Dendrobium aphyllum(Rohb. ) C. E. Fishcher为市场上流通品种，其药理和化学成分的研究都相对较少，赵永灵[2]等从兜唇石斛的茎中分离得到3种多糖: AP-1,AP-2,AP-3。它们的分子量分别为86 300，61 500，43 100。它们是β-(1→4)连接的,含O-乙酰基的,吡喃型的直链D-葡萄甘露聚糖，能使ICR纯系小鼠脾重量、胸腺重量增加，抗体细胞数明显增多，T细胞和B细胞显著增殖，具有免疫增强作用。张朝凤等[3]从兜唇石斛分离了11个芳香族类成分,其中9个为茋类化合物是首次从该植物中分离得到，4, 4′-二羟基-3, 3′、 5-