健脾养荣片对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠保护作用.docVIP

健脾养荣片对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠保护作用 　 【摘要】 　【目的】观察健脾养荣片对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫功能的 影响 。【 方法 】取NIH小鼠60只随机分为6组，即健脾养荣片低、中、高剂量组（剂量分别为4、8、16g·kg-1·d-1），鲨肝醇组（剂量为0.055g·kg-1·d-1），模型组和正常组，每组各10只，分别按设计剂量灌胃给药，在第5天时用环磷酰胺200mg/kg腹腔注射复制小鼠免疫低下模型，至第9天检测各组小鼠外周血白细胞计数、碳粒廓清实验、骨髓有核细胞计数、脾指数和脾淋巴细胞增殖反应。【结果】健脾养荣片中、高剂量组和鲨肝醇组小鼠白细胞数显著高于模型组（P＜0.01）；健脾养荣片中剂量组白细胞数与鲨肝醇组比较显著升高（P＜0.05）。健脾养荣片中、高剂量组廓清指数K显著升高（P＜0.05），经校正后，其校正廓清指数a值比较，健脾养荣片中剂量组高于模型组（P＜0.01）。健脾养荣片中剂量组骨髓有核细胞数与模型组比较显著升高（P＜0.01），显著高于健脾养荣片低剂量组和鲨肝醇组（P＜0.05）。健脾养荣片中剂量组和鲨肝醇组的脾指数显著升高（P＜0.05）；健脾养荣片中、高剂量组和鲨肝醇组均能拮抗环磷酰胺对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的抑制作用（P＜0.01）。【结论】健脾养荣片能增强免疫功能低下小鼠的免疫功能，升高小鼠外周血白细胞数。 毕业论文 【关键词】 健脾养荣片/药 理学 白细胞减少/中药疗法 白细胞减少/免疫学 疾病模型 动物 小鼠 毕业论文 　　健脾养荣片是广州中医药大学第一附属 医院 根据许鑫梅教授多年临床经验方研制而成的 治疗 脾胃气血亏虚证的中成药，对白细胞减少症有良好的疗效［1］。本 研究 观察了健脾养荣片对免疫功能低下模型小鼠免疫功能的影响。现报道如下。 　　 1 材料与方法 毕业论文 　　1.1 实验动物 　　NIH小鼠，6～8周龄，雌雄各半，体质量18～22g，由广州中医药大学实验动物中心提供，粤检证字第0025458号。 毕业论文 　　1.2 药品 　　环磷酰胺注射剂由上海华联制药有限公司生产（批号：2006306），每瓶200g，用蒸馏水溶解，稀释成10mg/mL；鲨肝醇片由广东市桥制药厂（番禺）生产（批号：051209），用蒸馏水溶解，稀释成2.75mg/mL；健脾养荣片水煎剂由广州中医药大学第一附属医院购得饮片，用蒸馏水水煎浓缩，配制成浓度0.20、0.40、0.80g/mL；中华墨汁由北京一得阁制，使用时先高速离心去其下层液，再低速离心去其上清液，将中层液用生理盐水配成浓度为250g/L的墨汁；RPMI1640培养基为Gibco公司产品；脂多糖（LPS）、T细胞丝裂源刀豆蛋白A（ConA）、二甲基噻唑二苯基四唑溴盐（MTT）均为美国Sigma公司产品。 毕业论文 　　1.3 仪器 　　722分光光度计由上海仪器 分析 二厂生产；CX21奥林巴斯光学显微镜由日本奥林巴斯公司生产。 　　1.4 造模［2］、分组给药 　　NIH小鼠60只，在动物房适应饲养3d后，将小鼠随机分为6组：正常组，模型组，健脾养荣片低、中、高剂量组（剂量分别为4、8、16g·kg-1·d-1），鲨肝醇组（剂量为0.055g·kg-1·d-1），每组各10只。正常组按常规方法喂养，其他组小鼠均灌胃给予相应药液4d，于第5天腹腔注射0.2g/kg环磷酰胺1次，然后继续灌胃给药4d。 　　1.5 小鼠血白细胞计数 　　各组于实验第1天（给药前）、第5天、末次给药（第9天）后1h分别于眼眶静脉丛取血测定白细胞。每次取血20μL，吹入盛有0.38mL白细胞稀释液的试管中，摇匀，将盖玻片放在白细胞计数板正中，充液，静置2～3min，计数白细胞，数4角大方格的白细胞总数，×50即为白细胞数/mm3，再×106即转换成标准单位×109·L-1。 毕业论文 　　1.6 小鼠碳粒廓清试验［3］157 　　于末次给药后1h尾静脉注入250g/L中华墨汁10mL/kg，于注射后1、5min用吸管分别从眼球后静脉丛取血20μL，溶于1g/LNa2CO32mL溶液中摇匀，置分光光度计在波长675nm下比色，测定光密度（D）。将小鼠颈椎脱臼处死，称取体质量，取出小鼠肝脏、脾脏，分别称肝脾质量。按下列公式 计算 廓清指数K或校正廓清指数a：K=（LogD1-LogD2）/（t2-t1）;a=3K×mbody/（m肝+m脾） 　　其中，D1、D2为不同时间所取血的光密度；t2-t1为取2份血样的时间差。 论文代写 　　1.7 小鼠骨髓有核细胞计数［5］253 　　于末次给药后1h，颈椎脱臼处死小鼠，剥离股骨，取右肢股骨，用体积分数3%