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食品中嗜热菌芽孢的检测
食品中嗜热菌芽孢的检测;1.微生物学的基本理论 2.嗜热微生物的介绍 3.嗜热菌的检测方法;微生物的概念;特征;个体小:;微生物的主要类群;微生物的五大共性;个体小:微米、纳米 群体表面积大;(二)吸收多,转化快; 人类(300万年) 爬行类(2亿年) 两栖动物(3亿年) 鱼类、陆生动物(4亿年) 后生动物(6亿年) 古细菌 蓝细菌 好氧性异养细菌 真核微生物 (35亿年) ( 32亿年) (20亿年) (15亿年) ;南极冰盖下的微生物;南极Vostok湖冰芯样品中的微生物;易变异;(五)分布广,种类多;嗜热微生物的概念; 嗜热菌的最适生长温度65~70℃,40℃以下不能生长。超嗜热菌又称之为嗜高温菌,其最适生长温在80~110℃,最低生长温度在55℃左右。大部分超嗜热菌是古生菌,但也有真细菌归属此类。;嗜热微生物的发现;耐热菌的生境;耐热机制(生物化学原理);首先,这些生物中的酶和其他蛋白质比嗜温微生物中的酶和蛋白质更具有耐热性,并且这些大分子实际上只有在高温下才能起到最佳作用。其原因可能是氨基酸序列不同,使酶以不同的方式进行折叠,从而使此酶能耐受热变性作用。;嗜热菌细胞膜的稳定性也与其耐热机制有关。它的细胞膜上长链饱和脂肪酸的比例随着温度的提高而增多,相应的不饱和脂肪酸则减少,而饱和脂肪酸比不饱和脂肪酸能生成更强的疏水链,这些疏水链更有利于膜对高温的稳定性。此外,嗜热菌的tRNA中G.C含量高,可提供较多的氢键,故具有独特的热稳定性。;因为嗜热菌可以在高温条件下进行繁殖,在食品热加工过程中难以将其灭活,所以食品生产检测中需要测定嗜热菌的菌落总数;嗜热菌的检测方法;实验原理;当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后(如培养基成分培养温度和时间、PH值、需氧性等)所取1ml(g)检样中所含菌落的总数。 ;嗜热芽孢杆菌在特定的时间中,经100℃或106℃热处理后,能在指定的培养环境和非选择性培养基中,55℃培养生长形成菌落的细菌芽孢。包括需氧芽孢、厌氧芽孢,其中需氧芽孢包括平酸菌芽孢,厌氧芽孢包括产硫化氢厌氧芽孢和不产硫化氢厌氧芽孢。接种后的培养基通过沸水热处理15分钟,能把非嗜热菌灭活,通过55℃培养即可得到嗜热菌。 ;嗜热芽孢杆菌,其细菌繁殖体对培养基要求低,在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上生长良好,表面粗糙呈米黄色。其最低生长温度为28℃,最高生长温度70~77℃。最适生长繁殖温度为56~65℃,培养24h即可形成菌落,37℃下24h看不到菌落,在pH6.8~7.2的培养基中生长良好。 ;实验方法;高压灭菌锅的注意事项;样品制备: 将20g样品放入盛有适量玻璃珠的250 mL灭菌三角烧瓶内,加灭菌蒸馏水至100mL刻度线,振摇,制成均匀的混悬液。 ;接种培养和计数;将此混合物在沸水或蒸汽柜中放置15 min。 ;轻微搅拌使尽快冷却,再将全部混合物等量倾注至5个灭菌培养皿内。凝固后于其??面覆盖一薄层2%灭菌琼脂 待覆盖琼脂凝固后,倒置培养皿于55℃保持一定湿度培养48 h。 ;计数5个平板上的菌落;谢谢
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