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关于蔓性千斤拔药材开发探究
关于蔓性千斤拔药材开发探究【中图分类号】 R93 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2011)05-0285-01 【摘要】目的蔓性千斤拔总黄酮提取工艺优选。方法以浸膏得率和总黄酮含量为评价指标,利用正交实验L9(34)考察料液比、提取时间、提取温度、提取次数4个因素对提取工艺的影响。结果蔓性千斤拔总黄酮含量的最佳水提工艺为以1∶30倍水量,于75℃条件下水提3 h,共提取3次。结论水提时间对蔓性千斤拔总黄酮的提取有较大影响。该方法工艺合理,为工业化大生产提供参考。 【主题词】 蔓性千斤拔 总黄酮 水提法 千斤拔始载于《植物名实图考》,为豆科千斤拔属(Radix Flemingiae Philippinensis)植物蔓性千斤拔Flemingia philippinensis (Merr.et Rolfe)Li]的根。广泛分布于我国云南、四川、贵州、湖南、广西、广东、福建和台湾等地。有关千斤拔的应用,在金鸡虎丸、壮腰健肾丸、千金片等中成药中目前均有报道。千斤拔成分具有活血化淤、祛风利湿的作用,疗效确切,有良好的效果。长期以来对蔓性千斤拔的提取研究甚少,而采用正交实验对蔓性千斤拔进行提取的研究目前未见报道。因此本文通过对蔓性千斤拔总黄酮成分提取工艺的研究,旨在为进一步合理开发千斤拔提供参考依据。 一 材料与仪器 1 材料:蔓性千斤拔根,购自广西药材采购供应站,经长春中医药大学刘大有教授鉴定为蔓性千斤拔的根。粉碎成粗粉备用;芦丁对照品,购自中国药品生物制品检定所;其它试剂均为分析纯。 2 仪器:101A-1型旋转蒸发器-上海亚荣生化仪器厂;电子分析天平-奥豪斯国际贸易(上海)有限公司;ZF-I型三用紫外分析仪-上海顾村电光仪器厂;紫外-可见分光光度计,TU1810型 普析通用公司。 二 方法 1 提取工艺的设计以水作为提取溶剂,以蔓性千斤拔浸膏得率和总黄酮含量为考察指标,选择料液比、提取时间、提取温度、提取次数为考察因素,应用L9(34)正交表设计实验,探讨最佳提取工艺条件。 2 含量测定方法 1) 标准溶液的配制称取芦丁标准品(105℃烘至恒重)20 mg,用70%乙醇溶解并定容至100 ml容量瓶中, 精密配制0.20 mg/L的芦丁标准溶液。 2) 标准曲线的制备精密量取芦丁标准溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0 ml,分别置于10 ml容量瓶中,各加70%乙醇至5 ml,加入5%NaNO2 0.3 ml,摇匀, 放置6 min;加入10%Al(NO3)0.3 ml,摇匀,放置6 min;加入5%NaOH 4 ml,再加70%乙醇定容至刻度,摇匀,放置15 min后,以相应的溶液空白做参比,在510 nm的波长处测定吸收度,以吸收度A为纵坐标,浓度C为横坐标,绘制标准曲线。用最小二乘法经线性回归,求得芦丁浓度(C)与吸光度(A)的关系曲线的回归方程为:A= 0.891 7C+0.009 1,r=0.999 7。 3) 样品总黄酮含量测定称取蔓性千斤拔粗粉20 g,共9份,分别按正交表2安排进行回流提取,提取液经过滤,滤液定容于100 ml容量瓶中,移取1 ml,乙醇定容于25 ml容量瓶中,作为样品溶液。按标准曲线的制备法测定吸光度,然后按照标准曲线法计算总黄酮含量。 3 浸膏得率的测定精密量取样品溶液20 ml,至干燥至恒重的蒸发皿上,于水浴上蒸干,在105℃干燥3 h,移至干燥器中冷却1 h,迅速称定重量,计算浸膏得率。 三 结果 1 正交实验结果通过测定浸膏得率、浸膏中总黄酮含量,以浸膏得率和总黄酮含量的乘积为综合评价指标。 2 方差分析将正交实验结果进行方差分析。 以综合指标评价,由表2中极差R值大小显示,各因素作用主次为BCAD;由表3方差分析结果表明,B因素的影响具有显著性意义P0.05,以A3B3C2D2为最佳,即以1∶30倍水量,于75℃条件下水提3 h,共提取3次。 3 优化方案的验证按照A3B3C2D2进行验证实验,结果显示,平均浸膏得率为12.06%,平均总黄酮含量为1.67%(n=3)。 四 讨论 通过正交实验设计,优选出蔓性千斤拔总黄酮的最佳提取工艺为蔓性千斤拔药材与水的比例为1∶30,于75℃条件下提取3 h,共提取3次。 该提取工艺简便,成本低、收率高,对蔓性千斤拔的工业化生产具有一定的参考价值。 水提时间对蔓性千斤拔总黄酮的提取有较大影响。该方法工艺合理,为工业化大生产提供参考。 因此本研究结果对进一步开发千斤拔药材具有一定参考意义。 参考文献 [1] 年晓莉, 徐海波,王明煜,王慧竹,关铭:蔓性千斤拔总黄酮提取工艺的研究[J]
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