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怎样保存需要干贮的试剂 容器 容器必须能盖紧，内部有放干燥剂的空间。对于一些试剂，广口瓶是最好的。对于更大的瓶子来说，玻璃或塑料的干燥器是必需的。干燥器有不同的形状、大小和材料，应该首先考虑大小。性质活泼的试剂需要真空保存，任何用于厌气培养细菌的容器也需要真空润滑剂。 干燥剂 干燥剂通常是蓝色或紫色粗糙的碳酸钙小圆球，或是相类似的圆球。干燥剂一般装在袋子、桶或是有孔的罐子里。干燥剂也可以用于气体的干燥，但大多数实验室并不采用。  干燥器 ?PC-3塑料真空干燥器 玻璃干燥器 如何储存光敏感试剂 棕色瓶或琥珀色瓶储存，或者用铝箔包好。 管装试剂可以放在盒子中，可冻存或运输的盒子最适合。将常规信息贴在盒子上，如“内有光敏感试剂”，但是光敏感试剂应是盒子中的唯一试剂，不要在盒子中到处寻找其他试剂。 常见的光敏感试剂有放线菌素D、丝裂菌素C、氮蓝四唑(NBT)、酚、利福霉素和四环素。 如何储存氧敏感试剂 氮气瓶必须放在化学通风橱的附近，因为通常有机溶剂的溶液需要氮气，使用时打开通风橱。 确定氮气瓶用带子固定住。 将巴氏管插入和压力调节器相连的管子中。 打开氮气，将流量调节到将管子靠近手背也几乎感觉不到为止。 在通风橱中打开试管或瓶子，试管和瓶子应妥善的放置在架子上。 将巴氏管的尖端放入容器口至能看到液体表面有波浪，保持5-10秒，较高的液体-气体比例需更长的时间。 迅速盖上容器。 关掉氮气。 保存瓶子，通常保存在-20℃，也可以保存在真空。 分装 为什么要分装 什么时候不用分装 如何分装 为什么要分装 防止储存液反复冻融造成的降解 避免多次使用造成的污染 空间上方便 节省时间 什么时候不用分装 稀释的物质不稳定 不常用的物质 使用不同浓度或浓度变化范围较大的物质 如何分装 ①配制储备液须知： 物质的工作浓度 在什么溶剂中溶解物质 分装的体积 ②决定配成几倍。 ③准备好无菌的管子，做好标签。如果要分装的物质必须冷藏，就把管子置于冰上。 ④配制浓溶液，如果需要，过滤。 ⑤把配好的无菌溶液分装到试管,存放在冷藏库或者是合适温度的架子上。 ⑥在记录本上做好记录。 冰箱和冷库 使用适当的冰箱或冷藏库 只有在取试剂的时候才打开冰箱门 冰箱或冷藏库内所有容器都必须有标签 定期清理那些已经不用的试剂 把所有试剂放置的位置记录下来 尊重私人空间 怎样除霜 除霜工作应该提前一个星期做计划 除霜前的清理是丢弃无用试剂的好时机 仔细地把所有试管包好 除霜要在上午尽可能早的时候开始 戴好手套除冰 备好任何可以吸水的东西，还有放置丢弃吸水物的盆 除霜 用吹风机加速除霜 除去所有产生的水 保持地面干燥 把除过霜的冰箱擦干净 等到冰箱完全干了才能插上电源 记录试剂的放置位置 实验室废物的处理 实验室废物处理须知： 化学组成 有危害还是无危害 是否有放射性 是否有生物危害 是否可以回收利用 处理的优先顺序 放射性，固体； 放射性，液体； 化学危害废物； 生物危害废物； 尖利物品； 无害的化学物品。 第九章 无菌技术操作 Logo 何时使用无菌技术 1 无菌技术 2 保护实验人员 3 无菌技术操作 什么时候使用无菌技术 当必须进行无菌操作时 无论什么时候在进行活的有机体实验或是为进行活体实验二准备培养基、缓冲液、培养容器等时，必须使用无菌操作技术，例如： 准备转化用的大肠杆菌培养物 制备LB平板培养基 分装细胞 过滤培养基的血清 打开和溶解冻细胞 什么时候使用无菌技术 在无菌操作有帮助的情况下 限制性酶切反应：虽然大部分酶被保存在甘油中，而且甘油浓度大于50%时通常不会长菌，但是在稀释酶和进行没有甘油参与的操作时存在潜在污染的可能性，而且微量的常见元素的污染也会抑制酶的活性。 进行PCR反应：进行PCR反应时要防止外源性DNA等的污染，避免造成酶活性和特异性降低。 利用32P磷酸盐标记细胞：使用无菌技术是出于对自身的保护，而不是出于保护细胞。出于无菌考虑，不应让盖子一直敞开，不能让气雾产生以及不要使用已经用过的移液管。 无菌技术 规则 工作区域尽可能地远离通风口和交通口 确保整洁的工作环境 实验前用消毒剂或清洁剂清洁工作区域 所有用到的移液管和试剂瓶都必须是无菌的 工作区间内尽量减少手臂的运动 把所有可能用到的东西都准备好 戴好乳胶手套并及时更换 技术技巧 最小化 保持试剂瓶与桌面成大约45°角时打开盖子 若必须取下盖子，则要把它倒放在干净的台面上 使用玻璃的移液管及打开试剂瓶时都要用火烧一下 塑料的试剂瓶和移液管不能用火烧 轻轻地吸取液体，不要旋转试剂瓶 不要让试剂瓶保持开口状态 停下你手中的工作 移液 使用可重复使用的玻璃移液管 使用