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乌头多糖提取分离及含量测定[摘要] 目的：从中药乌头（Aconitum Paniculigerum Nakai）中提取多糖并对其进行含量测定。方法：乙醇超声提取得到多糖，采用蒽酮-硫酸比色法、紫外可见分光光度法对其进行含量测定，检测波长为（490±1） nm。结果：乌头多糖在0.020 2～0.101 0 mg/ml范围内有良好的线性关系，r=0.999 7，平均回收率为100.60%，RSD=1.97%。药材中多糖以葡萄糖为标准含量，含量为15.82%。结论：该方法准确快速、重现性好。 [关键词] 乌头；多糖；提取；蒽酮-硫酸法 [中图分类号] R283.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2011）11（c）-070-02 Studies on extraction and determination of polysaccharide in Aconitum Paniculigerum Nakai YE Siyong, SHAO Mengxia, CHEN Zhi Department of Pharmacy, the Second People’s Hospital of Ji’nan City, Shandong Province, Ji’nan 250001, China [Abstract] Objective: To extract and determine the content of polysaccharide in Aconitum Paniculigerum Nakai. Methods: Polysaccharide was abtained by ethanol, and the content of polysaccharide was identified by anthrone-sulfuricacid colorimetry and UV method with the wavelength was (490±1) nm. Results: Polysaccharide had a good linearity within 0.020 2-0.101 0 mg/ml (r=0.999 7), the average recovery was 100.60% and RSD was1.97%. Conclusion: This method is quick, accurate and reliable for determination of Aconitum Paniculigerum Nakai. [Key words] Aconitum Paniculigerum Nakai; Polysaccharide; Extraction; Anthrone-sulfuricacid determination 圆锥乌头（Aconitum Paniculigerum Nakai）是乌头的一种，属毛茛科乌头属，其块根呈不规则倒圆锥形，圆锥乌头资源较丰富，该块根在吉林、辽宁等地做草乌用[1]，植物多糖广泛的生物活性已逐渐被人们利用，其独特活性和来源的天然性在保障人体健康应用中具有很大潜力[2-3]。药理研究表明，从乌头水提物中得到的乌头多糖具有降血糖作用[4]，本实验对乌头多糖提取工艺进行初步研究，旨在为乌头多糖的提取和开发利用提供参考依据。 1 仪器与材料 1.1 仪器 UV－3010型紫外可见分光光度计（日本日立）；FA1104型电子天平（上海天平仪器厂）；仪表恒温水浴锅（黄骅市综合电器厂）；Zk-92A真空干燥箱（上海实验仪器厂）。 1.2 试剂 蒸馏水、95％乙醇、蒽酮、浓硫酸等试剂均为分析纯；无水葡萄糖标准品由中国药品生物制品检定所提供，批号：0833-9501，乌头购于山东建联药店，经山东中医药大学中药鉴定教研室鉴定为毛茛科植物乌头的块根。 2 方法与结果 2.1 多糖的提取分离 称取干燥的圆锥乌头粉末5 g，共9份，加入一定量的95%乙醇超声提取一定时间后，离心，弃上清液，留药渣，自然挥干至无醇味。按照L9（34）正交设计试验表对提取次数、溶剂用量、浸渍温度、提取时间4因素进行考察。由方差分析优选最佳提取工艺，结果最佳提取工艺为：提取次数为3次，溶剂用量为20倍量，浸渍温度为45℃，提取时间为40 min。 2.2 乌头多糖含量测定方法学研究 2.2.1 葡萄糖对照品溶液的制备 精密称定干燥至恒重的葡萄糖对照品16.83 mg置于25 ml容量瓶中，以蒸馏水定容至刻度，配成0.673 mg/ml的储备液。精密吸取0.673 mg/ml葡萄糖对照品溶液