第七章病毒与原核生物的遗传学分析.pptVIP

F 因子 (F-factor) 转 重 移 IS3 δ 组 IS3 区 区 O IS2 P OriT OriV 复 区 制 2.结合的过程： (1) F纤毛(F pili)的合成,由纤毛素(pilin)蛋白构成，接合管仅使细胞初步接触； (2) 转移启动 转移起始区(transfer origin，Ori T) ，滚环复制； (3) 单链转移，复制，或重组。 F因子的整合特点 F有多个整合位点，主要在IS3处； E.cili染色体上有20个以上的整合位点； 双向整合； 整合通过 a. IS3等同源重组； b. 转座 （1）不同的非选择标记进入受体且重组 的时间不同，但都是稳定的； （2）各基因的重组频率随着时间的增加 而增加，直至极值； （3）按时间顺序，先重组和后重组的基 因，重组率的极值在逐步减少； 转导 通过病毒颗粒介导将染色体或质粒DNA转移到细胞中。 普遍性转导:宿主 DNA片断可能取代病毒基因组被包装在噬菌粒中 (1) 载体为P1，P22噬菌体; (2) 经错误包装宿主DNA片断和同源重组；(3) 转移任何片断。 特异性转导：宿主 DNA共价地加入到病毒基因组中 (1) 载体为λ噬菌体; (2) 经特异位点整合或同源重组； (3) 转移特定的基因。 特点： (1) F因子能高频传递； (2) 供体能力的传递与染色体无关； (3) F’变为Hfr时，整合到相同位点，F+变为 Hfr时整合到不同位点， (4) 高频传递特定的基因； (5) 形成的部分二倍体不稳定，约10-3会失 去F’因子。 三、非中断杂交与基因定位（重组作图） 利用F因子可以推动染色体到受体细胞中的特点，将要考察的基因全部转移到受体细胞中，然后考察各种基因型出现的频率，根据重组值计算公式计算重组值，进行作图。 为保证要考察的基因全部转移到受体细胞中，选择性标记必需处于转移的末断。 细菌基因重组的特征：与真核生物相比，原核生物的基因重组有两个特征，一是必需发生偶数次交换，细菌细胞才可存活；二是由于染色体不完整或选择培养的关系，野生的重组子才可存活，所以相反的重组子不出现。 四、E.coli的染色体图 E.coli的基因定位主要以中断杂交的方法进行的，所以E.coli的染色体图是以分钟作单位的。 第三节 细菌转化与基因定位 一、细菌的遗传转化 1928年Griffith发现肺炎双球菌的转化现象。1944年Avery证实转化因子是DNA。 转化（transformation)：外源DNA通过细胞吸收过程进入细胞，并使其发生遗传改变的过程。 感受态（competence)：细胞具有吸收外源DNA能力的生理状态。 有些细菌在生长过程中会自发地产生感受态，如肺炎双球菌，枯草杆菌等；有些细菌不会自发地产生感受态，必需经特殊处理才可产生感受态，如大肠杆菌。 1928年Griffith 的实验 遗传转化的机理 二、基因定位 遗传转化的转化因子一般在10000~20000bp之间，因此当两个基因连锁（注意：这里的连锁与真核生物的连锁不完全一样）,他们被同时转化（共转化）的频率要远高于不连锁的基因。利用共转化的特点，可以对连锁的基因进行基因