ELISA检测梅毒抗体假阳性产生原因研究.docVIP

ELISA检测梅毒抗体假阳性产生原因研究【中图分类号】R494 【文献标识码】B 【文章编号】1672－3783(2011)07－0404－02 【摘要】目的：分析酶联免疫吸附试验（ELISA）从临床样本中检测出梅毒阳性结果中的假阳性。方法：用ELISA 检出阳性552 例，再用梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验（TPPA）进行确认。结果：梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验（TPPA）检出阳性536例，阴性16例，ELISA假阳性率2.84%。。结论：为提高梅毒检测准确性实验室使用ELISA检测后阳性样本用梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验（TPPA）检测是较好的选择。 【关键词】酶联免疫吸附试验；假阳性. 【Abstract】Objective: : analysis of enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA) from clinical samples to detect syphilis positive result in false positives.Methods: ELISA was positive in 552 cases, and Treponema pallidum antibody gelatin agglutination test ( TPPA) for confirmation.Results: the antibody to Treponema pallidum gelatin agglutination test ( TPPA) were positive in 536 cases, 16 cases were negative, ELISA false positive rate 2.84%..Conclusion: in order to improve the accuracy of detection laboratory detection of syphilis using ELISA after positive samples using antibody to Treponema pallidum gelatin agglutination test ( TPPA) detection is a better choice. 【Key words】enzyme-linked immunosorbent assay ; false positive. 梅毒是苍白螺旋体引起的一种性传播疾病。近年来梅毒发病率呈逐年上升趋势，其感染率逐年增长对我国人民生命健康构成了严重的威胁，梅毒主要通过血液和性传播，早期梅毒有较强的传染性。血清学检测是诊断梅毒的重要依据之一，它在梅毒的诊断、治疗及研究方面均有重要意义。目前常用的酶联免疫吸附试验（ELISA）试验具有高特异性和敏感性的特点，但也存在假阳性的问题。本文旨在探讨ELISA检测梅毒抗体引起假阳性结果可能的原因。 1 对象与方法 1.1 研究对象：2006 年7月至2011 年4月期间我院住院病人、体检及部份门诊病人共552 人。其中男328人，女224人。 1.2 试剂： 试剂盒为上海科华生物工程有限公司产品双（抗原夹心一步法），；梅毒螺旋体抗体明胶凝集法诊断试剂为日本富士生物株式会社生产。 1.3 仪器：北京天石SM3型酶标仪，北京天石ZMX-988B型洗板机 1.4 方法：所有试验均严格按试剂盒说明书操作和判断，试剂均在有效期内使用。记录病人的性别、年龄、诊断并进行统计分析。 2 结果 ELISA法阳性552例，梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验（TPPA）阳性536例，阴性16例。ELISA法阳性率为97.16%，假阳性率2.84%。 3 讨论 3.1 技术因素： 3.1.1 标本处理不当，抽血后标本抗凝不完全和采血管中添加物的影响［1］，纤维蛋白容易析出，粘附在板孔形成纤维蛋白薄膜或絮状物，堵塞洗板机针头，造成洗板时清洗不干净，酶残留在相应的板孔中，使吸光度(0D)值偏高，造成假阳性结果。 3.1.2 标本溶血后释放出来的血红蛋白有极少量非特异性吸附到反应孔上，而这种非特异性吸附的量随着溶血程度增加而增加，在洗板不彻底的情况下血红蛋白中亚铁血红素依靠过氧化物酶样活性作用于底物，使其显色从而导致样本OD值升高［2］ 3.1.3 标本被细菌污染，一些细菌内含有辣根过氧化物酶会产生非特异性干扰，造成假阳性。 3.2 操作因素:洗涤过程中有溢出现象，使强阳性标本的反应液污染临近的阴性孔而出现假阳性；洗涤时间短或洗涤次数少，使洗涤不充分，板孔中酶试剂残留而出现假阳性；底物液反复使用被污染或受到强光照射时间过长也会出现