链霉素残留检测elisa试剂盒的研制及应用.pdf

维普资讯 畜牧兽 医学报 2008，39(3)：380—384 ActaVeterinariaetZootechnica Sinica 链霉素残留检测 ELISA试剂盒的研制及应用 范国英 ，王顺 岗 ，王 自良 ，张改平 ，邓润广 ，杨艳艳 (1．河南科技学院动物科学学院，新乡453003； 2．河南省农业科学院免疫学重点实验室 ，郑州 450002) 摘 要 ：本研究采用 EDC法人工合成链霉素抗原(SM—BSA)，免疫 BALB／c小 鼠，通过杂交瘤技术获得了分泌抗链 霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ，建立 了快速检测链霉素 (SM)残 留的酶联免疫方法 ，并成功研制 了试剂盒。然后 对其灵敏度 、准确度 、特异性、基质效应性等技术指标进行检测 ，同时应用该试剂盒对生长猪尿液 中的残 留情况进 行检测 。结果表明：除双氢链霉素外 ，该试剂盒与其它抗生素类药物均无交叉反应 ；线性检测范围为 1～128 g／L， 相关系数 R 一0．9251，灵敏度为0．45btg／L，半数抑制浓度 (IC )为 7．76btg／L，检测限为 1btg／L；猪尿样 的平均添 加 回收率为 84．1 ；基质对该试剂盒 的检测结果影响不大 。该试剂盒具有快速 、敏感、特异、简便等特点，适合于 SM残 留的快速检测 ，具有较高的推广应用价值 。 关键词 ：链霉素 ；单克隆抗体 ；细胞融合 ；竞争 ELISA；快速检测试剂盒 中图分类号 ：$859．84 文献标识码 ：A 文章编号 ：0366—6964(2008)03—0380—05 DevelopmentandApplicationofCompetitiveELISA Kitfor RapidDetectionofStreptomycinResidues FAN Guo—ying ，W ANG Shun—gang ，W ANG Zi—liang ， ZHANG Gai—ping ，DENG Run—guang ，YANG Yan—yan (1．CollegeofAnimalScience，HenanInstituteofScienceandTechnology。 Xinxiang453003，China；2．KeyLaboratoryforAnimalImmunology， HenanAcademyofAgriculturalScience，Zhengzhou450002，China) Abstract：BALB／cmicewereimmunizedwithstreptomycin—bovineserum albuminandhybridoma linesthatsecretemonoclonalantibodyagainststreptomycin(SM mAb)werefilteredwithcellfu— sion．A competitiveELISA testkitfordetectionofstreptomycin(SM—Kit)wasdevelopedwithan— ti—SM monoclonalantibody(SM mAb)anditssensitivity，veracity，specificityandtheeffectofma— trixweretested，respectively．Atthesametime，theurineoftheswinewasdetectedwith this ELISA—Kit．TheresultsindicatedthattheSM —Kithaslittleornocross—reactivitywithotheranti— bioticsbesidesofdihy