喜树碱对小鼠骨髓中性粒细胞XIAP、TLR4、CXCR2.PDFVIP

实实 验验 研研 究究 喜树碱对小鼠骨髓中性粒细胞 XIAP、TLR4 、CXCR2 表达及细胞凋亡影响的研究 于睿鹏 范潇婷 童宏选 邓恺 文 罗广彬 马志涛 （北京 中医药大学 ，北京 100029 ） 摘 要 目的 ：观察喜树碱 对 小鼠骨髓 中性粒 细胞 连锁 凋亡抑制蛋 白（ ）、 样 受体 （ ）、 趋化 因子 X XIAP Toll 4 TLR4 CXC 受体 （ ） 的表达和 细胞 凋亡的影响 。 方法 ：使 用 不连 续密度梯度 离心法分 离纯化 小鼠骨髓 中性粒 细胞 ， 2 CXCR2 mRNA percoll 对得 到 的 中性粒 细胞使 用不 同浓度 的喜树碱 加 药处理 1h。 使 用 荧光 定量 PCR 检 测喜树碱 对 小鼠骨髓 中性 粒 细胞 XIAP、 、 表 达 的影响 ；采 用 染 色法 ，使 用流式细胞仪检 测喜树碱 对 小鼠骨髓 中性粒 细胞 凋 TLR4 CXCR2 mRNA Annexin V-FITC/PI 亡的影响 。 结果 ：与 空 白组相 比 ，喜树碱作 用 后 ，小鼠骨髓 中性粒 细胞 、 、 表达水平下降 ，其 中喜 1h XIAP TLR4 CXCR2 mRNA 树碱 浓度 为 和 时 ，上述指标表 达水平 明显 下降（ ）；与 空 白组相 比 ，喜树碱 作 用 后 ，小鼠骨髓 中 2μmol/L 20μmol/L P＜0.00 1 1h 性粒 细胞 凋亡 比例略有升 高。 结论 ：喜树碱 因其具有 的拓 扑异构酶 I 毒性诱 导骨髓造血 干 细胞 凋亡而导致 中性粒 细胞数 量 减 少 ，同时还 可能通过抑制 骨髓 中性粒 细胞 的迁移和诱 导其 凋亡 ，减 少进入血液前往 炎症和肿瘤部位 的 中性粒 细胞数量 。 关键 词 喜树碱 骨髓 中性 粒 细胞 XIAP TLR4 CXCR2 细胞 凋亡 小鼠 中图分 类 号 R282.7 10.5 文献标 志码 A 文章编 号 1672-397X （20 17 ）06-0080-03 喜 树 碱 （Camptothecin ，CPT ）来 源 于 中药 喜 树 ， 胎 牛血 清 ，胰 蛋 白酶 （Amresco ），CXCR2 引 物 、TLR4 因其具 有很 好 的抗 癌 活性 ， 目前 已是 临床 常用 的化 引 物 、XIAP 引 物 、GAPDH 引 物 （Invitrogen ），反 转 录 疗 药 物 。 喜树碱类抗 肿瘤 药作 用 靶 点 明确 ，其 通 过 试 剂 盒 （ ） ， （ ） ， TOYOBO SYBR Green TOYOBO 70μm 结 合 拓 扑 异 构 酶 （ ， ）， 引 起 细 胞 滤 网 （ ），凋 亡 试 剂 盒 （ ）， I Topoisomerase TOP 1 FALCON