乳腺癌MCF-7细胞的分子生物学特征.pdfVIP

· l16 · 实用癌症杂志2012年3月第 27卷第2期 ThePracticalJournalofCancer，March2012，Vol27，No．2 乳腺癌 MCF-7细胞的分子生物学特征 叶 静 李明华 龙 霞 万汇涓 范 昭 【摘要】 目的 研究乳腺癌MCF-7细胞的分子生物学特征。方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)，对MCF-7细胞 进行 Stratifin和 CyclinD2基因甲基化检测；采用RT—PCR法，检测 Stratifin、CyclinD2和Dnmt3b基因的mRNA表达。结果 乳腺癌MCF-7细胞系中，Stratifin基因是非甲基化的，mRNA表达水平较高；CyclinD2基因完全甲基化，mRNA表达缺失； Dnmt3b基因呈明显表达。结论 Stratifin和CyclinD2基因的甲基化发生，可能下调其mRNA的转录表达，MCF-7细胞的 这些分子生物学特性可为乳腺癌的袁观遗传学研究提供一定的参考价值。 【关键词】 乳腺癌；MCF-7细胞；Stratifin基因；CyclinD2基因；Dnmt3b基因；甲基化；表达 中图分类号：R737．9 文献标识码：A 文章编号 ：1001-5930(2012)02—0116一o4 MolecularCharacteristicsofBreastCancerCellLineM CF-7 YEring，LI 凡g—hua，LONGXia，eta1． CentralLaboratory，PekingUniversityShenzhenHospital，Shenzhen，518036 A【bstract】 0bjective TostudythemolecularcharacteristicsofbreastcancercelllineMCF-7．Methods Methylations ofStratifinandCyclinD2geneswereexaminedbymethylation—specificpolymerasechainreaction(MSP)．ExpressionsofStratifin， CyclinD2andDnmt3bgenesmRNA weredetectedbyRT—PCR．Results Unmethylationandhig【hmRNA levelofStratifingene， completemethylationand expressiondeletion ofCyclinD2 gene，significantexpressionofDnmt3b genewereshowed inbreast cancercelllineMCF-7．Conclusion MethylationsofStratifinandCyclinD2 genesmaybedown—regulatemRNA expressions． Thesemolecularcharacteristicsprovidecertainreferencetoepigeneticstudyofbreastcancer． K【eywords】 Breastcancer；MCF-7cell；Stratifingene；CyclinD2gene；Dnmt3bgene；Methylation；Expression (ThePracticalJournalofCancer，2012，27：116～119) 乳腺癌MCF-7细胞是 1种乳腺癌经典的细胞系， 1．2 方法 在很多乳腺癌研究中都采用此细胞系。该细胞具备分 1．2．1 细胞培养 MCF-7细胞复苏后用含 10％小牛 化的乳腺上皮细胞一些特性，比如雌二醇合成，可以表 血清的RPMI1640培养液，于37 、5％ CO 条件下培 达雌激素和孕激素受体。Stratifin(又称 14—3．3o-)和 养，换液培养，传代，待细胞稳定后收集细胞待用。 CyclinD2均为与细胞周期调节有关的基因，甲基化的