乙型链球菌(GroupBStreptococcus)检验标准作业手册.PDFVIP

草案版 乙型鏈球菌(Group B Streptococcus)檢驗標準作業手冊 1. 目的： 乙型鏈球菌(Group B Streptococcus; GBS; 學名Streptococcus agalactiae被) 認為是嬰兒出生前後感染及死亡的重要原因。被乙型鏈球菌感染的嬰兒 往往會導致嚴重的併發症，包括敗血症、肺炎及腦膜炎等，嚴重則會造 成死亡及永久性的神經性後遺症。乙型鏈球菌感染新生兒的途徑，通常 是在分娩的時候經由母體感染，所以若能在孕婦懷孕時期早期診斷出是 否感染乙型鏈球菌，就可以有效預防新生兒感染的危險。 因此 ，美國疾病管制局建議懷孕 35-37 週的婦女應做全面性的篩檢，採 檢的部位為陰道及直腸末端，可以增加乙型鏈球菌的診斷機率約 50﹪以 上，若在確定診斷後給予孕婦抗生素的治療，新生兒感染乙型鏈球菌的 機率則可以降低75﹪以上 。 2. 範圍： 懷孕 35-37週的婦女包括計畫性剖腹產孕婦( ) 。 3. 材料及試劑： 3.1Amies或 Stuart’s的運送培養基 3.2增菌培養基：可選擇使用，步驟中以 LIM broth 為例說明之。 3.2.1 LIM broth (含 10 μg/ml的 cloistin及 15 μg/ml的 nalidixic acid 之 Todd-Hewitt 培養液) 3.2.2 含 5%綿羊血的 Trans-Vag broth (含 8 μg/ml的 gentamicin及 15 μg/ml的 nalidixic acid 之 Todd-Hewitt 培養液) 3.2.3 StrepB carrot broth含( Granada medium可偵測溶血型的 GBS菌 株) 3.3建議培養基 3.3.1 Blood agar plate (BAP) 3.3.2 Columbia colistin-nalidixic acid agar (CNA) 3.3.3 乙型鏈球菌產色培養基(CHROMagar GBS) ：依產品說明使用 3.4二氧化碳(5%)培養箱 3.5觸媒 (3% catalase): 10 mL, 30% H O + 90 mL 無菌水，2-8℃保存 2 2 3.6革蘭氏染色套組 (Gram stain kit) 3.7標準菌株 3.7.1 Staphylococcus aureus ATCC 25923 草案版 3.7.2 Streptococcus agalactiae ATCC 12386 3.7.3 S. pyogenes ATCC 19615 3.8Hippurate (1%)試劑： 1 g sodium hippurate + 100 mL 無菌水，分裝0.4 mL備用，保存於-20℃，直到品管異常後丟棄 3.9Ninhydrin (3.5%)試劑： 50 mL acetone + 50 mL 1-butanol + 3.5 g ninhydrin; 存放於棕色瓶內，室溫下可保存 6個月 3.10自動化鑑定儀器或其他商業試劑套組 4. 培養步驟： 4.1 LIM broth 4.1.1 將陰道肛門拭子- 接種到LIM broth中。 4.1.2 將接種後之LIM broth 於35-37℃，二氧化碳(5%)培養箱中，培 養 18-24 小時。 4.1.3 無論是否混濁，將 LIM broth 次培養於BAP(或其他建議培養基 ) 上。 4.1.4 將次培養之 BAP或其他建議培養基( )於35-37℃ ，二氧化碳(5%) 培養箱中培養 18-24 小時。 4.1.5 若無懷疑菌落，則延長培養 18-24 小時後再行觀察 。 4.2 StrepB carrot broth 4.2.1 將陰道肛門拭子-